综述：镓(III)复合物通过诱导免疫原性细胞死亡标志物实现化学免疫治疗

这篇综述系统回顾了Trk（原肌球蛋白受体激酶）小分子激动剂的二十年研究历程，重点探讨了通过高通量筛选发现的候选化合物（如7,8-DHF、gambogic amide等）及其在神经退行性疾病治疗中的潜力，同时揭示了当前研究面临的机制争议（如PAMs与真正激动剂的区分）和转化医学挑战。文章特别强调了结构数据缺失对计算机辅助设计的限制，以及胆固醇结合域对TrkB功能调控的新发现。

　　

小分子Trk调节剂的研究进展与挑战

1. 引言

二十年前，科学界尚未发现经过验证的Trk（原肌球蛋白受体激酶）小分子激动剂。随着对神经退行性疾病治疗潜力的认识加深，高通量筛选商业化合物库成为重要策略。这种方法避免了高水平化学合成需求，但成本和通量限制迫使研究者必须进行预筛选。优先选择已知毒性谱和血脑屏障（BBB）穿透性的现有药物成为关键标准。

1.1 小分子探针开发

理想的探针开发策略需要易得的候选化合物库、便捷的初筛和次级 assays。然而，细胞表面受体研究面临三大挑战：跨膜受体结晶困难、蛋白-蛋白相互作用（PPIs）调控复杂，以及次级 assays的局限性。例如，癌症相关靶点可通过细胞毒性快速评估，但神经保护作用的检测模型更为复杂。

1.2 NT·Trk·p75相互作用

神经营养因子（NGF、BDNF、NT-3、NT-4）与Trk受体选择性结合，同时与"死亡受体"p75相互作用。p75不仅能诱导凋亡，还能与Trk协同调控细胞存活。NTs通过二聚体形式结合Trk，触发酪氨酸激酶结构域自磷酸化，进而激活PI3K-AKT、RAS-MAPK等信号通路。

2. 高通量筛选发现的小分子Trk调节剂

2.1 生物相关库筛选

Ye团队通过筛选约2000种化合物，发现了多个Trk激动剂候选：

• 7,8-二羟基黄酮（7,8-DHF）在多种模型中显示TrkB依赖性神经保护作用，但存在剂量依赖性副作用

• 脱氧格杜宁促进轴突再生，但作用机制存在争议

• 阿米替林表现出TrkA/B双重激活，但临床不良反应显著

2.3 传统药物中的先导化合物

包括：

• 甲基3,4-二羟基苯甲酸酯（MDHB）通过上调BDNF发挥视网膜保护作用

• 巴西绿蜂胶中的baccharin激活TrkA/AKT/MEK1通路

• 脱氢表雄酮（DHEA）衍生物通过TrkA/p75相互作用显示神经保护活性

3. 计算机辅助设计的先导化合物

Longo团队通过模拟NTs环区结构，设计了LM系列化合物：

• LM11A-31进入阿尔茨海默病临床试验，但出现胃肠道不良反应

• LM22A-4在创伤性脑损伤模型中促进功能恢复

• LM22B-10激活TrkB/C，改善亨廷顿病模型运动缺陷

4. 争议性发现

三个独立团队（Bard、Sames、Mat?oka）对经典TrkB激动剂提出质疑：

• 酶联固定细胞免疫分析（ELFI）显示多数候选物不诱导pTrkB

• 仅DMAQ-B1在微尺度热泳实验中显示可测量的TrkB结合（K_d 5.6 μM）

• 7,8-DHF结合133种非靶标蛋白，提示广泛脱靶效应

5. TrkB正向变构调节剂（PAMs）

突破性研究发现：

• TrkB跨膜区含有胆固醇识别序列（CARC域），最佳浓度（～20 μM）可增强BDNF活性

• 抗抑郁药氟西汀和氯胺酮以μM级亲和力结合TrkB跨膜区，稳定活性二聚体构象

• 致幻剂LSD以nM级亲和力结合特定位点，显著增强BDNF诱导的TrkB-Y816磷酸化

6. 结论与展望

当前研究面临的核心挑战包括：

1. 细胞模型局限性：原代神经元与转染细胞系的膜组成差异影响胆固醇依赖性信号

2. 检测方法争议：pTrk抗体特异性不足，磷酸化动力学难以捕捉

3. 机制模糊性：多数先导化合物可能作为PAMs而非真正激动剂

未来方向应聚焦：

• 开发能区分PAMs与真正激动剂的新方法

• 设计更贴近NTs结构的化合物（如环肽）

• 探索fMRI等非侵入性评估手段

• 深化胆固醇-TrkB相互作用机制研究

该领域虽充满挑战，但Trk调节剂在神经精神疾病治疗中仍具重大潜力，特别是随着对跨膜调控机制认识的深入，有望开辟药物开发新途径。