菲律宾木薯丛枝病相关真菌Theobromae丝核菌的检测、分离与鉴定研究

（编辑推荐）本研究首次在菲律宾木薯丛枝病(CWBD)样本中成功分离鉴定Theobromae丝核菌(Rhizoctonia theobromae)，通过特异性PCR(98.96%检出率)、形态学特征(直角分支菌丝/单珠状隔膜)及ITS/28S rDNA序列分析(99.7%相似性)，证实其与病害的强关联性，为东南亚木薯产业病害防控提供关键病原学依据。

　　

研究亮点

• Theobromae丝核菌与菲律宾木薯丛枝病的强关联性

采用物种特异性28S引物对2017-2022年采集的97份病样进行PCR检测，96份(98.96%)呈阳性，而453份无症状样本仅1例检出(0.22%)。单例阴性结果可能源于样本降解或病原菌载量不足。该数据显著高于既往报道的东南亚其他国家检出率，暗示菲律宾菌株可能存在独特的流行病学特征。

• 形态学与分子特征解析

分离菌株呈现典型的丝核菌属特征：棉絮状白至黄色菌落、直角分支菌丝、桶孔隔膜(dolipore septa)及单珠状菌丝(monilioid hyphae)。ITS和28S rDNA序列分析显示，菲律宾分离株与印尼可可维管束条纹病(VSD)菌株相似度达99.7-100%，而与老柬越的木薯分离株相似度略低(98.4-98.8%)，提示可能存在地域适应性分化。

• 遗传多样性揭示种群稳定性

单倍型分析显示π=0.0047的低遗传多样性，中性检验无显著差异，表明菲律宾Theobromae丝核菌群体呈现克隆扩张模式。这一发现与东南亚其他国家的CWBD流行区数据一致，暗示该病原可能通过无性繁殖维持遗传稳定性。

• 柯赫氏法则验证的技术挑战

尽管在种植早期(2个月苗龄)成功分离病原菌，但继代培养时因菌丝生长停滞难以完成致病性验证。研究者指出该菌的"近专性寄生"特性(fastidious nature)及培养基竞争性杂菌干扰是主要技术瓶颈，与可可VSD研究中的困境高度相似。

结论

本研究首次在菲律宾确立Theobromae丝核菌与CWBD的强关联性，其广泛地理分布与高检出率警示该病害对木薯产业的潜在威胁。尽管未能完全满足柯赫氏法则，但多维度证据链已为后续病害管理策略修订奠定基础。建议开发基于ITS/28S标记的快速检测工具，并探索抗病品种选育以应对这一新兴生物胁迫。