外源性tau蛋白聚集体内化与早期内吞标记物及溶酶体共定位机制研究

本文揭示了tau蛋白聚集体通过内吞途径（Rab5标记的早期内吞体）进入细胞并与溶酶体（Lamp1标记）共定位的关键机制。研究发现tau 4R微管结合域与DOPC双层膜相互作用时能保持膜结构完整性，但在神经细胞（N2a）中会导致轴突结构减少。研究为阿尔茨海默病（AD）等tau蛋白病中蛋白聚集体传播提供了新的分子见解，特别强调了巨噬细胞（RAW 264.7）在清除tau聚集体过程中溶酶体系统的重要作用。

　　

Highlight亮点发现

蛋白质表达纯化与tau聚集体实验

全长tau蛋白和微管结合域（4R）按既定方法表达。使用含卡那霉素的LB培养基培养至OD₆₀₀达0.5-0.6时，用1 mM IPTG诱导4小时表达。通过ProPac IMAC 10柱纯化，采用10-200 mM咪唑梯度洗脱，缓冲液含20 mM Na₂HPO₄和500 mM NaCl。

tau聚集体不会破坏DOPC半透层结构

拉曼光谱分析显示（图1A），tau聚集体在1410 cm^-1处出现CH₂-CH₃变形峰，1227 cm^-1处为β折叠（Amide III区），975 cm^-1处为β折叠的C-C伸缩振动。530 cm^-1附近的S-S伸缩峰表明二硫键存在。非芳香族氨基酸如赖氨酸在...

Discussion讨论

值得注意的是，中风等脑损伤和血管功能障碍都可能促进tau或其他淀粉样蛋白的传播。血管性疾病与痴呆进展相关。实验显示肝素能改变tau聚集体的形态和二级结构，而tau聚集体与DOPC作用时不影响膜完整性，提示内吞作用等其他机制参与其中。

Conclusion结论

蛋白聚集体在细胞间的转移和内化是tau病理传播的关键机制。中风等脑损伤会加速AD患者痴呆进程。虽然大脑存在脉络丛、血管周隙等分区结构，但严重脑损伤会导致这些分区渗漏。鉴于存在多种潜在毒性构象的聚集体...