SPINT1-AS1通过miR-656-3p/PLCXD3轴抑制胃癌氧化损伤与凋亡的机制研究

本研究针对胃癌（GC）中长链非编码RNA（lncRNA）SPINT1-AS1的功能机制不明确的问题，通过调控SPINT1-AS1/miR-656-3p/PLCXD3轴，揭示了其抑制GC恶性表型的作用。研究发现SPINT1-AS1通过竞争性结合miR-656-3p上调PLCXD3表达，进而抑制Wnt/β-catenin通路并降低氧化应激，为GC靶向治疗提供了新策略。

　　

胃癌是全球高发恶性肿瘤，其分子机制复杂且预后差异大。近年来，长链非编码RNA（lncRNA）在肿瘤中的作用备受关注，但SPINT1-AS1在胃癌中的功能仍属未知。渭南职业技术学院、重庆市九龙坡区第二人民医院和陕西省肿瘤医院的研究团队在《Discover Oncology》发表的研究，首次揭示了SPINT1-AS1通过miR-656-3p/PLCXD3轴调控胃癌进展的分子机制。

研究采用TCGA数据库分析和细胞实验相结合的策略，通过RT-qPCR、Western blot、双荧光素酶报告基因检测等技术，发现SPINT1-AS1在胃癌中显著低表达，且与患者不良预后相关。体外实验证实SPINT1-AS1过表达可抑制GC细胞增殖、迁移并促进凋亡，同时降低活性氧（ROS）水平。机制研究表明，SPINT1-AS1作为竞争性内源RNA（ceRNA）吸附miR-656-3p，解除其对PLCXD3的抑制作用，进而通过降解MALAT1 RNA阻断Wnt/β-catenin通路激活，并下调Nrf2/HO-1抗氧化通路。动物实验进一步验证了SPINT1-AS1的抑瘤作用。

3.1 SPINT1-AS1在胃癌中显著下调

TCGA数据显示SPINT1-AS1在GC组织表达低于正常组织（P=0.00023），且随TNM分期升高而降低（P=0.0147）。FISH定位显示其主要分布于细胞质，提示ceRNA功能。

3.2 SPINT1-AS1过表达抑制恶性表型

EdU和Transwell实验表明，SPINT1-AS1过表达使MKN-28和HGC-27细胞增殖率下降57%/42%，迁移抑制率达70%。ROS和MDA水平降低50%以上，抗氧化酶SOD/CAT活性提升2-3倍。

3.3 miR-656-3p/PLCXD3轴验证

双荧光素酶报告基因证实SPINT1-AS1与miR-656-3p直接结合（结合位点突变使荧光素酶活性恢复85%）。PLCXD3作为miR-656-3p靶标，在GC中表达降低且与生存期正相关（P<0.001）。

3.7 信号通路调控机制

Western blot显示SPINT1-AS1过表达使p-GSK-3β^Ser9和活性β-catenin^{Ser33/37/Thr41}蛋白水平下降60%，而PLCXD3敲除可逆转此效应。RNase R实验证实PLCXD3促进MALAT1降解（半衰期缩短40%）。

该研究不仅阐明了SPINT1-AS1作为肿瘤抑制因子的新机制，还为开发基于lncRNA的GC诊疗策略提供了理论依据。特别是发现PLCXD3通过RNA结合域（而非其磷脂酶活性域）调控MALAT1稳定性，拓展了非编码RNA互作网络的认知。未来需在临床样本中验证该轴的诊断价值，并探索其与现有化疗方案的协同效应。