下一代测序技术在晚期非小细胞肺癌中的诊断准确性：ctDNA肿瘤分数对血液与组织检测一致性的影响

针对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)组织活检不足的临床难题，香港研究人员开展了一项前瞻性研究，通过对比血液(ctDNA)与组织活检的靶向Panel二代测序(TP-NGS)数据，发现ctDNA肿瘤分数(TF)>1%时，血液检测对可操作突变(如EGFR)的阳性符合率(PPA)达100%，且与组织TMB(tTMB)高度相关。该研究为无创液体活检替代组织检测提供了关键循证依据，成果发表于《The Journal of Liquid Biopsy》。

　　

在肺癌精准医疗时代，组织活检仍是分子分型的金标准，但约30%的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者面临取样不足的困境。肿瘤异质性和长达21天的检测周期更让临床决策雪上加霜。液体活检技术虽被寄予厚望，但血液中循环肿瘤DNA(ctDNA)含量波动大，克隆性造血(CHIP)突变干扰，使得血液与组织检测的一致性始终存在争议。香港大学李嘉诚医学院临床肿瘤学中心的研究团队通过一项覆盖香港7家医院的前瞻性研究，为这一难题提供了突破性答案。

这项名为"晚期NSCLC精准肿瘤计划"的研究创新性地采用美国FDA批准的FoundationOne^?CDx和Liquid CDx检测平台，对561例患者进行配对分析。研究特别关注ctDNA肿瘤分数(TF)这一关键变量，将≥1%定义为高TF组，<1%为低TF组，首次系统评估了TF阈值对检测效能的影响。

研究采用多中心前瞻性队列设计，包含340例非配对患者和221例同步采集血液/组织的配对患者。通过靶向Panel二代测序(TP-NGS)分析300+基因变异，同时检测微卫星不稳定性(MSI)和肿瘤突变负荷(TMB)。统计方法上，采用McNemar检验评估配对样本差异，Kaplan-Meier曲线分析生存结局，并创新性地引入阳性符合率(PPA)和阴性符合率(NPA)作为一致性评价指标。

未配对队列：基因组特征差异

在340例患者中，血液检测组CHIP相关基因DNMT3A/TET2突变率显著高于组织组(p<0.05)，而NCCN推荐生物标志物(如EGFR/ALK)的检出率无差异。值得注意的是，组织组的TMB-H(≥10 muts/Mb)比例达25.9%，显著高于血液组的8.9%(p<0.0001)，且血液检测周期比组织检测缩短38%(13天vs 21天)。

配对队列：ctDNA TF的决定性作用

在221例配对患者中，高TF组(50.2%)的血液与组织检测展现出惊人一致性：对于可操作突变，PPA达100%，且bTMB与tTMB的Spearman相关系数达0.71。相比之下，低TF组的PPA骤降至47.5%，相关系数仅0.13。特别值得关注的是，高TF组患者更易发生骨(27.3% vs 14.8%)和肝转移(36.4% vs 23.1%)，且生存预后显著更差(PFS 7.3月 vs NR，p=0.00041)。

生存分析：TF的预后价值

研究揭示ctDNA TF具有重要预后价值。在配对队列中，高TF组中位PFS仅7.3个月，显著低于低TF组(未达到，p=0.00041)；OS同样呈现12.2月 vs NR的显著差异(p=0.00046)。这种差异在未配对队列中同样存在，提示高TF可能反映肿瘤负荷和侵袭性生物学特征。

讨论与意义

该研究首次在前瞻性大样本中证实：当ctDNA TF≥1%时，血液TP-NGS可完全替代组织检测，这对临床实践具有三重革新意义。首先，为无法获取组织的患者提供了合规检测路径，香港队列显示这类患者占比近40%。其次，将检测周期压缩至13天，比组织检测快1.5周，为靶向治疗争取宝贵时间。最后，ctDNA TF本身成为预后生物标志物，高TF提示侵袭性疾病和不良预后。

研究同时揭示了血液检测的局限性：低TF时组织检测仍不可替代；CHIP突变(如DNMT3A)可能导致假阳性；bTMB阈值需重新校准。这些发现为液体活检的精准应用划定了边界，也为未来技术优化指明方向。

这项发表于《The Journal of Liquid Biopsy》的研究，通过严谨的设计和创新的TF分层策略，为NSCLC精准诊疗提供了level 1循证依据。随着液体活检技术迭代，这种"血液优先"的策略或将重塑肺癌分子分型格局，让更多患者受益于无创、快速的精准医疗。