颌骨间充质基质细胞通过强化造血微环境调控B细胞分化并缓解急性感染

本研究系统揭示了小鼠颌骨间充质干细胞（MSCs）与造血干细胞（HSCs）的空间互作关系，通过单细胞测序、体外共培养和LPS感染模型证实：颌骨MSCs通过分泌CXCL12激活PAX5转录因子，显著促进HSCs向B细胞分化，在急性感染中降低促炎因子IL-6/IFN-γ水平并提高生存率，为骨-免疫轴调控提供了新机制。

　　

单细胞测序解析颌骨MSCs与HSCs的互作图谱

通过优化胶原酶消化方案获得高活性小鼠颌骨单细胞悬液，10x Genomics平台测序显示MSCs与HSCs存在显著配体-受体交互（CXCL12-CXCR4权重最高）。免疫荧光证实Col1⁺ MSCs与Sca1⁺ HSCs在颌骨空间共定位，GO分析提示MSCs富集细胞外基质组织和免疫调节通路。

颌骨MSCs的多向分化潜能验证

流式检测显示P3-P5代细胞高表达CD29/CD90（>95%）、低表达CD45（<3%）。成骨诱导14天后ALP活性提升4.2倍（p<0.001），Alizarin Red染色显示钙结节形成；成脂诱导21天可见脂滴积聚。RT-qPCR证实Runx2、Osx基因随时间梯度上调，免疫荧光显示OPN蛋白表达量较对照组增加3.8倍。

仿生共培养系统揭示剂量依赖性调控

Transwell体系（0.4μm孔径）中，MSCs与Lin^?Sca1⁺c-kit⁺（LSK）细胞以1:1至10:1比例共培养。流式数据显示：10:1组B220⁺ B细胞比例达38.7%±2.1%（对照组12.4%±1.3%，p<0.0001），CD11b⁺髓系细胞和CD3⁺ T细胞分别增加1.8倍和1.3倍。

PAX5介导的B细胞发育机制

RT-qPCR检测共培养组B细胞关键基因：Ebf1上调2.1倍，Rag1提升1.7倍，Pax5表达量达对照组的3.4倍（p<0.001）。免疫荧光定量显示，10:1共培养组PAX5平均荧光强度（MFI）从152±18增至487±34（p<0.0001），与B220⁺细胞数量呈正相关（R²=0.89）。

LPS感染模型的治疗效应

5 mg/kg LPS腹腔注射后，MSCs治疗组7天存活率提升至85%（PBS组40%）。ELISA检测血清炎症因子：IL-6从1,243 pg/mL降至487 pg/mL（p<0.01），IFN-γ从689 pg/mL降至215 pg/mL（p<0.05）。

CXCL12/CXCR4轴的核心作用

单细胞数据重分析显示MSCs特异性高表达Cxcl12（UMAP聚类Z-score=3.8）。成骨诱导14天后Cxcl12 mRNA水平升高5.3倍（p<0.001），与PAX5激活程度显著相关（p<0.01）。

这些发现不仅阐明颌骨MSCs通过CXCL12-PAX5通路调控造血-免疫耦合的新机制，更为感染性疾病细胞治疗提供了靶向干预策略。