埃索美拉唑通过增强氧化应激与DNA损伤协同增敏顺铂对胃癌细胞的细胞毒性作用

这篇研究首次证实质子泵抑制剂(PPI)埃索美拉唑(esomeprazole)能显著增强顺铂(cisplatin)对SNU-1胃癌细胞的杀伤作用。通过XTT法、流式细胞术等检测发现，联合用药可协同降低细胞活力(CI<1)，增强氧化应激(TOS↑/TAS↓)，促进线粒体膜电位去极化，并通过激活ATM/γH2AX通路加剧DNA损伤(8-oxo-dG↑)，为克服胃癌顺铂耐药提供了新策略。

　　

酸性微环境与胃癌治疗的突破

1 引言

胃癌仍是全球癌症死亡的主要原因，其发生与幽门螺杆菌(H. pylori)感染密切相关。肿瘤微环境的酸性特征(pH调控)通过V型ATP酶(V-ATPase)介导的氢离子外排，不仅促进肿瘤进展，还导致化疗耐药。质子泵抑制剂(PPI)如埃索美拉唑能抑制H⁺/K⁺-ATPase，既往研究显示其可逆转紫杉醇耐药，但联合顺铂的作用机制尚未阐明。

2 材料与方法

采用SNU-1胃癌细胞系，通过XTT法检测细胞活力，流式细胞术分析线粒体膜电位(JC-1染色)和凋亡(Annexin V)，ELISA检测8-羟基脱氧鸟苷(8-oxo-dG)和剪切PARP(cleaved PARP)。实验设置顺铂(1-200 μg/mL)、埃索美拉唑(25-250 μg/mL)单用及联用组，采用Chou-Talalay法计算联合指数(CI)。

3 研究结果

3.1 细胞活力

顺铂单用IC₅₀为3.024 μg/mL，而埃索美拉唑单用无显著毒性。但联用组CI均<1，显示协同效应，25 μg/mL埃索美拉唑使顺铂IC₅₀降低至1.2 μg/mL。

3.2 氧化应激

联合治疗组总氧化状态(TOS)较顺铂单用升高42%，总抗氧化状态(TAS)降低35%(p<0.001)，表明氧化损伤加剧。

3.3 细胞凋亡

流式检测显示联用组晚期凋亡细胞达38.7%，显著高于顺铂单用组的21.4%(p<0.001)，cleaved PARP水平同步升高2.3倍。

3.4 线粒体功能

联用组线粒体膜电位去极化细胞比例达67%，较单用组(45%)显著增加(p<0.001)，提示凋亡通路激活。

3.5 DNA损伤

γH2AX焦点形成增加3.1倍，8-oxo-dG水平升高至单用组的1.8倍(p<0.001)，ATM磷酸化水平同步提升，表明DNA双链断裂修复系统被激活。

4 讨论

本研究首次揭示埃索美拉唑通过多重机制增敏顺铂：① 破坏pH稳态抑制V-ATPase功能；② 通过ROS爆发引发氧化应激；③ 诱导线粒体途径凋亡；④ 协同增强DNA损伤。特别值得注意的是，联合治疗使8-oxo-dG(氧化损伤标志物)与γH2AX(DNA断裂标记)产生显著协同效应，这可能是克服顺铂耐药的关键。

局限性在于未直接检测V-ATPase活性变化，且缺乏正常细胞毒性数据。未来研究可探索该方案对其他胃癌细胞系及动物模型的效果，并开展相关临床试验验证。这些发现为胃癌联合治疗提供了新思路，尤其对顺铂耐药患者具有重要转化价值。