基于特异性单克隆抗体的点印迹法快速检测与鉴别豚鼠气单胞菌感染及污染

为解决气单胞菌属(Aeromonas spp.)污染检测难题，研究人员通过免疫小鼠获得3种高效单克隆抗体(mAb)AC-19/AC-4/AC-16。其中AC-4对豚鼠气单胞菌(A. caviae)展现100%特异性与灵敏度，检测限达1×107 CFU/ml，成功应用于隐形眼镜样本检测，为食品和临床样本提供免培养的快速诊断方案。

　　

气单胞菌属(Aeromonas spp.)是众所周知的致病菌，能通过污染的水源或食物引发严重感染。这项研究开创性地开发了三种高效单克隆抗体(mAb)克隆——通过给小鼠注射豚鼠气单胞菌(A. caviae)抗原获得的AC-19、AC-4和AC-16。点印迹实验显示，AC-19能识别5种气单胞菌(包括A. caviae、嗜水气单胞菌等)的88个样本，但会与类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides)交叉反应。而AC-4和AC-16则展现出对A. caviae的绝对特异性，灵敏度分别达到100%(31/31)和64.52%(20/31)。检测限实验表明，AC-16灵敏度最高(5×10⁶ CFU/ml)，AC-19(3×10⁷ CFU/ml)和AC-4(1×10⁷ CFU/ml)紧随其后。在隐形眼镜模拟污染实验中，这些抗体展现出卓越的实用价值。这些mAb无需复杂的前处理流程，就能在食品、临床样本乃至感染动物中实现气单胞菌属的快速鉴别诊断，特别是AC-4堪称A. caviae检测的"黄金标准"抗体。