NR4A3高表达肥大细胞通过JAK2/STAT6信号重编程肿瘤相关巨噬细胞促进卵巢癌转移

本研究针对卵巢癌(OC)微环境中肥大细胞(MC)的促转移机制展开探索。研究人员通过单细胞测序发现NR4A3high MC亚群在转移灶中显著富集，实验证实其通过分泌CXCL16/IL-8激活STAT6通路诱导巨噬细胞M2极化，进而促进OC侵袭转移。该研究首次揭示NR4A3调控的MC-巨噬细胞轴在OC转移中的关键作用，为靶向肿瘤微环境提供新策略。

　　

卵巢癌作为致死率最高的妇科恶性肿瘤，约70%患者确诊时已发生腹腔转移。这种特殊的"播种式"转移模式与肿瘤微环境(TME)中免疫细胞的异常调控密切相关。尽管近年来免疫治疗取得突破，但卵巢癌微环境中各类免疫细胞的功能异质性及其相互作用网络仍是未解之谜。其中，肥大细胞(MC)作为先天免疫系统的重要成员，既能通过释放组胺等介质参与过敏反应，又在肿瘤发展中展现出"双刃剑"作用——在某些癌症中抑制肿瘤生长，却在另一些情况下促进血管生成和转移。这种矛盾现象提示我们：MC可能存在不同功能亚群，而决定其促瘤或抑瘤特性的关键分子开关尚待揭示。

南京医科大学附属南京医院（南京市第一医院）普通临床研究中心的研究团队在《Translational Oncology》发表的重要研究，通过整合单细胞测序技术与功能实验，首次发现核受体NR4A3是调控MC功能特性的关键分子，并阐明其通过CXCL16/IL-8-STAT6轴驱动巨噬细胞M2极化，最终促进卵巢癌转移的完整机制。这项研究不仅为理解卵巢癌微环境免疫调控提供了新视角，更为开发靶向NR4A3的免疫治疗策略奠定理论基础。

研究人员采用多组学技术开展系统性研究：首先对6例上皮性卵巢癌组织（3例原发灶和3例转移灶）进行scRNA-seq分析；通过构建NR4A3过表达的骨髓源性肥大细胞(BMMC)模型，结合RNA-seq筛选差异表达基因；建立MC-巨噬细胞共培养体系评估极化效应；采用Transwell和小鼠皮下/腹腔移植瘤模型验证体内功能。关键实验技术包括单细胞转录组测序、流式细胞术、免疫荧光染色、ELISA检测和特异性抑制剂干预等。

研究结果部分包含五个重要发现：

1. NR4A3在肥大细胞中的表达水平与卵巢癌预后相关

   单细胞测序揭示卵巢癌组织中存在三个MC亚群，其中特异性表达NR4A3的MC-2亚群在转移灶中比例显著升高（log₂FC=3.14）。临床样本免疫荧光显示，卵巢癌组织中NR4A3⁺MC数量显著多于正常组织，且与远处转移和高级别病理特征正相关。

2. NR4A3^high肥大细胞脱颗粒能力下降但分泌特定细胞因子

   NR4A3过表达使MC的TPSAB1表达降低，组胺和LTA4释放减少，但CXCL16和IL-8分泌显著增加。RNA-seq分析发现差异基因主要富集于坏死性凋亡和细胞周期等通路。

3. NR4A3^high肥大细胞通过分泌CXCL16和IL-8促进巨噬细胞M2极化

   共培养实验显示，NR4A3^high MC通过分泌CXCL16/IL-8激活巨噬细胞JAK2/STAT6通路，上调TGF-β并抑制IL-6表达，诱导CD206⁺M2型巨噬细胞比例增加（流式检测升高2.1倍）。这种效应可被CXCR6抑制剂ML339和CXCR1/2抑制剂Reparixin逆转。

4. M2巨噬细胞显著促进卵巢癌细胞迁移侵袭

   Transwell实验证实，NR4A3^high MC诱导的M2巨噬细胞使ID8细胞迁移能力提升3.2倍，侵袭能力增加2.8倍。伤口愈合实验显示，抑制剂处理组可部分逆转这种促转移效应。

5. NR4A3^high肥大细胞在体内促进卵巢癌转移并诱导免疫抑制

   在肥大细胞缺陷型(c-Kit W-sh/W-sh)小鼠中，NR4A3^high MC移植组腹腔转移灶数量增加4倍，腹水量增加3.5倍，且CD8⁺ T细胞比例下降40%，M2巨噬细胞比例上升2.3倍。皮下成瘤实验显示肿瘤体积增大2.8倍。

讨论部分指出，该研究首次建立NR4A3-CXCL16/IL-8-STAT6信号轴在卵巢癌转移中的调控网络。与传统认知不同，NR4A3在MC中展现出独特的促瘤功能，这种组织特异性效应可能与其调控的分泌组改变有关。值得注意的是，NR4A3^high MC通过双重机制促进肿瘤进展：一方面直接激活巨噬细胞的M2极化程序，另一方面间接抑制CD8⁺ T细胞的抗肿瘤免疫。这种免疫微环境的重编程为卵巢癌的腹腔转移提供了有利条件。

该研究的临床意义在于：首先，NR4A3⁺MC可作为卵巢癌转移的新型预测标志物；其次，靶向NR4A3-CXCL16/IL-8轴可能成为逆转免疫抑制微环境的治疗策略；最后，研究提出的MC-巨噬细胞相互作用模型为理解肿瘤微环境中免疫细胞互作提供了新范式。未来研究可进一步探索NR4A3在MC中的上游调控机制，并开发特异性靶向该通路的小分子抑制剂。