蓝藻源新型免疫调节肽的制备、结构鉴定与活性研究——基于Limnospira platensis的RAW264.7细胞免疫调控机制探索

本文推荐：研究团队通过酶解和超滤技术从钝顶螺旋藻（Limnospira platensis）藻蓝蛋白中制备分子量<3?kDa的木瓜蛋白酶水解物（PP），经UPLC-MS/MS鉴定出6种新型免疫调节肽（FGRFR/SPSWY/YNKFPY/GYYLRM/MFDAF/MAACLR）。实验证实这些肽能显著提升RAW264.7巨噬细胞活力、吞噬能力及细胞因子（NO/IL-6/TNF-α）分泌，并通过分子对接揭示其与TLRs受体的互作机制，为功能性食品和药物开发提供新思路。

　　

Highlight

材料与方法

钝顶螺旋藻（L. platensis）粉由深圳螺旋藻公司提供。实验采用木瓜蛋白酶（Papain, 100,000?U/g）、碱性蛋白酶（Alcalase）、胰蛋白酶（Trypsin）和胃蛋白酶（Pepsin）酶解藻蓝蛋白，并通过超滤获得<3?kDa组分（PP）。细胞实验使用RAW264.7巨噬细胞系，以MTT法检测活性，Griess法测定一氧化氮（NO）释放，ELISA分析细胞因子（IL-6/TNF-α）水平。

藻蓝蛋白得率与纯度

通过反复冻融结合硫酸铵沉淀和阴离子交换色谱法，从螺旋藻中提取的藻蓝蛋白（C-PC）得率达56.13?mg/g，纯度4.48，符合药用和营养品标准。

酶解程度分析

水解度（DH）是评估蛋白质酶解效果的关键指标。研究发现木瓜蛋白酶水解物（PP）的DH值最高，表明其肽段释放效率最优，为后续活性肽筛选奠定基础。

结论

从PP中鉴定的6种新型肽（FGRFR、SPSWY、YNKFPY、GYYLRM、MFDAF、MAACLR）均能显著增强RAW264.7细胞的免疫功能，包括提升吞噬活性、促进NO和促炎因子分泌。分子对接显示这些肽通过特异性结合Toll样受体（TLRs）触发免疫应答，且经模拟胃肠消化后仍保持稳定性，具备功能性食品和药物开发潜力。