重组减毒沙门氏菌疫苗递送鸡滑液支原体抗原的构建与保护效果评估

这篇研究推荐评价一种新型重组减毒沙门氏菌疫苗(RASV)递送鸡滑液支原体(M. synoviae)抗原的免疫效果。通过构建表达RS01790、BMP、GrpE等五种抗原的rSC0130疫苗株，证实其能稳定表达外源蛋白并诱导特异性体液(IgG/IgA)、黏膜和细胞(IFN-γ/IL-17)免疫应答，显著降低气管黏膜损伤和气囊病变评分，为防控这一全球性禽类病原体提供了新策略。

　　

ABSTRACT

鸡滑液支原体(M. synoviae)是严重危害家禽业的病原体，现有疫苗保护效果有限。本研究利用重组减毒沙门氏菌(RASV)rSC0130载体，构建了表达RS01790、BMP、GrpE等五种抗原的疫苗株，系统评估了其免疫保护效应。

Introduction

该病原体引发滑膜炎、气囊炎等疾病，造成全球经济损失。现行MS-H减毒活疫苗存在野毒株定植、突变风险等问题。研究采用具有mRNA干扰调节功能(SIRV)的rSC0130载体，其含有的MazF酶可选择性降解含ACA序列的宿主mRNA，从而增强靶抗原表达。

Materials and methods

实验选用SPF鸡胚，通过电转将五种抗原基因插入pS0018质粒，构建重组疫苗株。采用Western blot验证蛋白表达，ELISA检测血清IgG和黏膜sIgA，CCK-8法分析淋巴细胞增殖，qPCR定量细胞因子和病原载量。

Results

1. 构建的疫苗株生长曲线与空载体对照组无差异，质粒可稳定传代50代以上。

2. 抗原蛋白在胞质、周质和上清中均有分布，其中RS01790和BMP组诱导的肠黏膜IgA水平显著高于其他组。

3. 细胞免疫显示：RS01790刺激Th1/Th2反应(IFN-γ⁺/IL-4⁺)，BMP激活Th1/Th2/Th17通路，GrpE主要引发Th1/Th17应答。

4. 攻毒保护实验中，RS01790、BMP、GrpE疫苗组平均日增重(ADWG)恢复显著，气囊病变评分降低2-3级，气管黏膜厚度减少40-60%。

Discussion

该研究首次证实RASV递送的RS01790(ABC转运脂蛋白)和BMP(ABC转运底物结合蛋白)能协同激活多维度免疫应答。特别是BMP抗原诱导的IL-17A分泌，对清除呼吸道黏膜感染至关重要。相比传统灭活疫苗，该平台兼具成本效益和交叉保护潜力，为禽支原体疫苗研发提供了新思路。

技术亮点

1. 采用SIRV技术实现抗原表达增效

2. 黏膜sIgA水平与气管保护呈正相关

3. Th17应答与气囊病变改善显著相关

4. 双价疫苗设计可能进一步提升保护率

局限性与展望

当前研究未评估疫苗对垂直传播的阻断效果，未来需开展田间试验验证免疫持续期。结合OMVs(外膜囊泡)递送系统或可增强抗原呈递效率。