单细胞测序揭示气管鳞状细胞癌（TSCC）肿瘤微环境特征及化疗响应的分子机制

这篇研究通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析了5例恶性与2例非恶性气管鳞状细胞癌（TSCC）样本的70,682个细胞，首次构建了TSCC的单细胞图谱。研究揭示了化疗对T细胞状态转换的关键转录调控因子，鉴定了恶性与非恶性组间差异表达的基因（DEGs）和特异性细胞间通讯网络，为TSCC的靶向治疗提供了新分子基础。

　　

引言

气管鳞状细胞癌（TSCC）作为非小细胞肺癌（NSCLC）的重要亚型，其肿瘤微环境（TME）的异质性与治疗抵抗密切相关。本研究通过单细胞RNA测序技术，解析了恶性与非恶性TSCC样本的细胞组成差异，重点关注了免疫细胞动态变化与化疗响应的分子机制。

材料与方法

研究纳入7例患者样本（5例恶性TSCC，2例良性肉芽肿），采用10x Genomics平台进行单细胞转录组测序。通过Seurat和Harmony包进行数据整合与批次校正，利用Monocle2拟时序分析追踪T细胞分化轨迹，CellChat解析细胞间通讯网络，SCENIC鉴定转录调控因子（TFs）活性。

结果

细胞组成与T细胞异质性

恶性组中性粒细胞比例显著升高（29.25% vs 11.07%），提示其参与肿瘤免疫逃逸。CD4⁺ Tconv与Tregs的拟时序分析显示，细胞状态沿良性向恶性样本过渡，伴随IKZF1和RUNX1等转录因子活性变化。NK细胞中PD-1/IL-17通路相关基因富集，凸显其抗肿瘤潜能。

成纤维细胞与中性粒细胞的分子特征

恶性组CXCL14⁺癌相关成纤维细胞（CAFs）比例增加，其TGF-β和p53通路激活促进上皮-间质转化（EMT）。差异基因分析发现，恶性组上调基因富集于WNT、Hippo等促癌通路，而非恶性组高表达IL-17/TNF等免疫相关基因。中性粒细胞在两组中均显示保守的炎症应答特征，但恶性组NF-κB通路活性增强。

上皮细胞恶性转化的驱动因素

TP63和TP53在恶性上皮细胞中特异性高表达，调控细胞周期与氧化应激通路；ETS2则在良性组中主导生长因子响应。生存分析证实TP63高表达与患者预后显著相关。

恶性特异性细胞互作网络

恶性组中CAFs通过HGF-MET、WNT5B-FZD等134对配体-受体互作促进肿瘤侵袭。其中HGF高表达与患者总生存期延长相关，而MDK低表达预示更好预后。

讨论

研究首次绘制了TSCC的单细胞分子图谱，揭示了化疗诱导的T细胞重编程及CAFs-上皮细胞互作的关键作用。局限性包括样本量不平衡和化疗方案异质性，未来需结合多组学数据验证HGF/WNT等通路靶点的临床价值。

（注：全文严格依据原文数据，未添加非文献支持结论）