坤泰胶囊通过调控AMPK介导的自噬改善卵巢早衰的机制研究

本研究针对卵巢早衰(POF)现有治疗方案的局限性，探讨了传统中药坤泰胶囊(KTC)通过激活AMPK/mTOR信号通路抑制卵巢过度自噬的治疗机制。研究人员通过建立环磷酰胺(CTX)诱导的POF大鼠模型，结合网络药理学预测和Western blot等技术验证，发现高剂量KTC(1.8 g/kg/d)能显著改善卵巢功能指标(E2↑、AMH↑、FSH↓)，降低氧化应激(MDA↓、ROS↓)，并通过AMPK/mTOR通路调控自噬标志物(LC3B-II/I↓、Beclin1↓、P62↑)。该研究为中药治疗POF提供了分子机制依据，发表于《Reproductive Sciences》。

　　

卵巢早衰(Premature Ovarian Failure, POF)是困扰现代女性生殖健康的重大难题，约1%的育龄女性在40岁前就会面临卵巢功能衰退的困境。传统激素替代疗法虽能缓解症状，却可能增加卵巢癌等恶性肿瘤风险。面对这一临床困境，广州迈尔斯生物技术有限公司的研究团队将目光投向了传统中药坤泰胶囊(Kuntai Capsule, KTC)——由熟地黄、黄连、黄芩等六味药材组成的复方制剂，临床已显示对POF、多囊卵巢综合征等妇科疾病具有改善作用，但其分子机制始终是未解之谜。

为揭开KTC的作用奥秘，研究人员设计了一套"从临床到基础"的研究策略。首先通过环磷酰胺(CTX)构建POF大鼠模型，模拟人类卵巢早衰的病理特征；随后采用低(0.6 g/kg/d)、高(1.8 g/kg/d)剂量KTC干预，以经典激素DHEA作为阳性对照；最后结合网络药理学预测和分子生物学验证，绘制出KTC作用的"靶点-通路-效应"全景图。

关键技术方法包括：建立CTX诱导的POF大鼠模型；通过H&E染色和ELISA评估卵巢形态与激素水平；采用TUNEL和流式细胞术检测细胞凋亡；运用Western blot分析AMPK/mTOR通路关键蛋白；结合网络药理学筛选核心靶点；使用自噬抑制剂3-MA和mTOR抑制剂雷帕霉素(RAPA)进行机制验证。

KTC改善POF大鼠卵泡发育

研究发现KTC能显著逆转CTX导致的卵巢萎缩，高剂量组卵巢重量增加41.7%。通过H&E染色观察到，模型组原始卵泡数量锐减，颗粒细胞排列紊乱；而KTC-H组不仅原始卵泡数量恢复近正常水平，还可见黄体形成。Western blot显示KTC剂量依赖性上调卵泡发育关键因子BMP-15、GDF-9和VEGFA的表达，其中BMP-15在高剂量组提升达2.3倍。

KTC缓解卵巢细胞凋亡与衰老

ELISA检测显示KTC-H组使雌激素E₂水平提升68%，同时降低促卵泡激素FSH 53%。氧化应激指标呈现"两升两降"特征：SOD活性恢复152%，MDA含量降低61%。免疫组化证实KTC能显著抑制衰老标志物P16和DNA损伤标记γH2AX的表达。流式细胞术显示KTC-H组使卵巢颗粒细胞凋亡率从21.3%降至9.8%，Western blot检测到凋亡相关蛋白Bax/Cleaved Caspase-3表达下调，而抗凋亡蛋白Bcl-2上调1.8倍。

网络药理学预测AMPK-mTOR通路关键作用

通过TCMSP数据库筛选出KTC主要活性成分槲皮素、山奈酚和木犀草素。基因富集分析显示这些成分的靶点显著富集于AMPK信号通路。实验验证发现KTC能激活AMPK磷酸化(p-AMPK/AMPK↑1.5倍)，同时促进mTOR磷酸化(p-mTOR/mTOR↑1.3倍)，形成"AMPK-mTOR信号轴"。

KTC通过AMPK-mTOR通路调控自噬

自噬标志物检测显示KTC-H组使LC3B-II/I比值降低42%，Beclin1表达减少35%，而自噬底物P62积累增加2.1倍。机制研究中，自噬抑制剂3-MA能增强KTC效果，而mTOR抑制剂RAPA则完全逆转KTC作用，证实AMPK-mTOR通路是KTC调控自噬的核心枢纽。

这项研究首次系统阐释了KTC通过"多成分-多靶点-多通路"协同作用治疗POF的机制：活性成分槲皮素等通过激活AMPK/mTOR信号轴，抑制卵巢过度自噬，改善颗粒细胞凋亡和卵泡发育障碍。该发现不仅为中药治疗POF提供了科学依据，更启示传统复方制剂可通过调控自噬平衡这一新兴途径发挥治疗作用。特别值得注意的是，高剂量KTC(1.8 g/kg/d)展现出与标准激素疗法相当的疗效，却避免了激素治疗的潜在风险，为POF患者提供了更安全的替代治疗方案。未来研究可进一步探索KTC活性成分的最佳配比，并开展临床剂量优化研究，推动中药在生殖医学领域的精准应用。