酪氨酸激酶抑制剂通过PI3K/AKT通路调控斑马鱼血管生成的作用机制研究

本研究针对眼科疾病中异常血管生成的治疗难题，研究人员通过斑马鱼模型系统评估了Dovitinib、Lapatinib和Telatinib三种酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的抗血管生成效应，并揭示PI3K/AKT通路激活剂SC79对TKI抑制作用的调控机制。研究发现Dovitinib和Telatinib能显著抑制ISV发育，且不同TKI通过差异调控VEGF受体(kdrl/flt1)和下游信号分子(akt2/pik3r1)发挥作用，为靶向治疗提供了新策略。

　　

在眼科疾病治疗领域，异常血管生成是导致年龄相关性黄斑变性和糖尿病视网膜病变患者视力丧失的关键因素。尽管靶向血管内皮生长因子(VEGF)的疗法已取得进展，但耐药性和副作用问题仍亟待解决。酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)作为多靶点药物，其抗血管生成效果及与PI3K/AKT等关键信号通路的交互作用尚不明确。温州医科大学宁波眼视光医院宁波市致盲眼病医学研究重点实验室的研究团队在《BMC Pharmacology and Toxicology》发表的研究，通过创新性地结合转基因斑马鱼模型和分子生物学技术，揭示了不同TKIs的作用差异及其机制。

研究主要采用三大技术方法：1) 转基因Fli-1:EGFP斑马鱼胚胎模型观察血管形态变化；2) 实时荧光定量PCR检测kdrl、flt1等血管生成相关基因表达；3) 最大耐受浓度(MTC)测定指导药物剂量选择。实验使用杭州Hunter生物科技公司提供的斑马鱼，通过国际AAALAC认证的动物设施培育。

MTC测定结果

通过48小时暴露实验确定Dovitinib、Lapatinib和Telatinib的MTC分别为0.488 μM、1.95 μM和0.031 μM，SC79为2.44 nM。浓度超过阈值会导致死亡率上升和发育异常，为后续实验提供安全剂量依据。

血管发育影响

Dovitinib(0.488 μM)使完整ISV数量减少16.9%(P<0.001)，Telatinib(0.031 μM)减少33.8%(P<0.001)，而Lapatinib无显著抑制。SC79单独处理则使ISV数量和长度分别增加7.4%(P<0.01)和9.9%(P<0.05)，证实PI3K/AKT通路的促血管生成作用。

基因表达调控

Dovitinib主要下调flt1表达(P<0.01)，Telatinib则广泛抑制kdrl(P<0.05)、flt1(P<0.001)和akt2(P<0.01)。SC79显著上调所有检测基因，包括kdrl(2.03倍)和akt2(1.64倍)。联合实验揭示TKIs可逆转SC79的促血管效应，其中Telatinib能同时抑制受体和下游通路基因，表现最强拮抗作用。

讨论与意义

该研究首次系统比较三种TKIs在相同模型中的效果差异：Dovitinib侧重VEGFR1抑制，Telatinib具有多靶点优势，而Lapatinib在PI3K/AKT激活背景下展现独特的VEGF配体抑制能力。发现SC79通过上调VEGF-PI3K/AKT轴促进血管生成，并部分抵消TKIs作用，这为临床中约5%的PI3K/AKT相关耐药现象提供解释。研究为眼科疾病精准治疗提供新思路——通过调节TKIs与PI3K/AKT通路的平衡实现血管生成控制，对开发联合用药策略具有重要指导价值。