短期无麸质饮食对儿童乳糜泻免疫调节作用的单细胞转录组学解析

为解决乳糜泻（CD）患儿短期无麸质饮食（GFD）免疫调节机制不明的问题，西班牙马拉加大学区域医院的研究团队通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析5例患儿外周血单个核细胞（PBMCs），发现GFD可下调促炎基因（如SMAD7）、上调免疫调节基因（如HLA-G），并促进调节性T细胞（Treg）向免疫抑制表型转化。该研究首次揭示GFD对儿童CD的快速免疫调控作用，为无创监测提供潜在生物标志物。

　　

乳糜泻（Celiac Disease, CD）是一种由麸质摄入触发的自身免疫性疾病，患者的小肠黏膜会因免疫反应遭到破坏。尽管终身严格无麸质饮食（Gluten-Free Diet, GFD）是目前唯一的治疗手段，但短期GFD如何调节儿童患者的免疫系统仍是一个谜。更棘手的是，现有诊断方法依赖侵入性活检或血清抗体检测，而儿童患者常因检查痛苦导致依从性差。此外，GFD执行中的无意违规（如隐藏麸质摄入）可能延缓康复，亟需开发非侵入性监测工具。

针对这一系列挑战，西班牙马拉加大学区域医院（Hospital Regional Universitario de Málaga）的Rafael Martín-Masot团队开展了一项开创性研究。他们首次采用单细胞RNA测序（scRNA-seq）技术，追踪5名8-14岁CD患儿在GFD治疗9-10个月前后外周血单个核细胞（PBMCs）的转录组变化，相关成果发表在《The Journal of Nutritional Biochemistry》。

研究团队运用三大关键技术：首先，通过粪便麸质免疫原性肽（GIP）检测严格筛选GFD依从者；其次，利用10x Genomics平台完成PBMCs的单细胞转录组测序；最后，结合Seurat软件进行聚类分析和Monocle 3拟时序分析。所有患者均通过ESPGHAN 2020标准确诊，并排除合并其他免疫疾病者。

免疫细胞亚群的重编程

研究发现GFD虽未显著改变免疫细胞比例，但诱导了1,082个差异表达基因（DEGs）。其中，促炎基因SMAD7（TGF-β信号抑制因子）表达下调，而免疫调节分子HLA-G和RNA剪接调控因子RBFOX2表达上调。特别值得注意的是，CD4⁺ T细胞中早期激活标志物CD69和乳糜泻风险基因TNFAIP3表达降低，提示效应功能减弱。

调节性T细胞的转型

通过高分辨率聚类，团队鉴定出395个FOXP3⁺调节性T细胞（Treg）。拟时序分析显示，GFD促使Treg沿"低抑制-高抑制"轨迹分化，伴随HLA-G表达升高和RNA解旋酶DDX5表达下降。已知DDX5会限制RORγt⁺ Treg的抑制功能，其下调可能增强肠道免疫耐受。

单核/巨噬细胞的动态变化

非经典单核细胞（CD14^lowCD16^high）比例在GFD后降低，但残留细胞高表达迁移相关基因（如CCL4）。研究者推测这可能反映其向炎症部位募集以促进组织修复。

这项研究首次绘制了儿童CD短期GFD后的免疫图谱，揭示GFD通过多途径协同恢复免疫平衡：既抑制效应T细胞活化，又增强Treg功能，同时调控单核细胞迁移。发现的HLA-G和DDX5等分子可作为潜在监测标志物，未来或能通过简单抽血评估GFD疗效。但研究也存在样本量小、缺乏功能验证等局限，需更大队列验证。

该成果的临床意义在于：① 证实GFD对儿童免疫系统的快速调节作用；② 为开发非侵入性监测技术提供靶点；③ 提示HLA-G激动剂或DDX5抑制剂可能是CD辅助治疗的新方向。正如研究者强调，这项工作为理解GFD的免疫机制打开了新窗口，将推动乳糜泻管理进入精准医学时代。