基于UPLC-MS/MS技术的人血浆中氯氮平及其两种代谢物总浓度与游离浓度同步定量方法的开发与验证

本研究创新性地建立了固相萃取(SPE)联用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)技术，实现了精神分裂症患者血浆中氯氮平(CLZ)及其代谢物N-去甲基氯氮平(NDC)、氯氮平-N-氧化物(CNO)总浓度与游离浓度的同步检测。该方法通过氘代内标(CLZ-D8/NDC-D8/CNO-D8)和多反应监测(MRM)模式，显著提升了检测灵敏度与特异性，为临床药代动力学研究提供了高效分析工具。

　　

质谱与色谱特征

在正离子模式下，质谱检测到CLZ、NDC和CNO的强[M+H]⁺信号。图1展示了CLZ、NDC、CNO及其对应内标物的前体离子和产物离子质谱图。通过多反应监测(MRM)技术，我们筛选出分析物与内标物的相同碎片离子，实现高灵敏度检测。

空白血浆或过滤血浆中总/游离CLZ、NDC、CNO及其内标物的色谱图显示，该方法在最低定量限(LLOQ)仍保持优异的分辨率。

讨论

本研究开发的SPE-UHPLC-MS/MS联用技术，首次实现人血浆中CLZ及其代谢物NDC、CNO总/游离浓度的同步定量。如表S2所示，相较于既往文献报道的检测方法，本方案在样本前处理效率（采用96孔板批量操作）和检测灵敏度（LLOQ达0.1 ng/mL）方面具有显著优势。

结论

该高通量检测方法成功实现人血浆中CLZ及其代谢物的精准定量，其创新性在于：①同步测定总/游离浓度；②采用氘代内标提高准确性；③适用于临床常规检测。研究获大分大学伦理委员会批准，为精神分裂症个体化用药提供重要技术支撑。