石墨烯氧化物固定化SELEX技术的优化研究：提升小分子适配体筛选效率的关键因素分析

本文推荐：该研究以三聚氰胺特异性适配体为模型，系统比较了基于石墨烯氧化物（GO-SELEX）和磁珠（Beads-SELEX）的文库固定化筛选技术。研究发现非离子表面活性剂可显著促进单链DNA（ssDNA）从GO表面解吸（Mode 1），而高靶标浓度是克服非特异性结合的关键（Mode 2）。研究为小分子适配体筛选的SELEX条件优化提供了实践指导，尤其对食品危害物检测领域具有重要参考价值。

　　

Highlight亮点

本研究通过模拟SELEX技术，首次系统揭示了文库固定化筛选模式中影响小分子适配体富集效率的关键因素。

Materials材料

三聚氰胺和氰尿酸购自阿拉丁公司。FAM标记的Mel-34-mut6适配体（5’-GCACACCGATGGCGGTCGTGTTTACGGGGTGTGC-3’）由生工生物合成。石墨烯氧化物（GO）购自J&K Scientific公司，链霉亲和素磁珠（SA beads）选用Enriching Biotechnology产品。

Mimic SELEX schematic illustration模拟SELEX示意图

如图1所示，模式一采用GO介导的文库固定化与靶标诱导释放策略；模式二仅用GO去除非靶标结合序列；模式三则为磁珠固定化SELEX。

Optimization of adsorption process in mimic GO-SELEX mode one

GO浓度优化实验显示（图2A），0.025 mg/ml GO可完全吸附FAM-Mel-34-mut6。热处理实验（图2B）表明95°C变性后冰浴骤冷能显著提升ssDNA与GO的结合效率。

Conclusions结论

研究发现：①非离子表面活性剂（如Tween-20）可促进ssDNA从GO表面解吸；②高靶标浓度（毫摩尔级）是克服磁珠SELEX中非特异性共释放的必要条件；③Tris-HCl缓冲体系（pH 7.4）最适于维持ssDNA-GO相互作用稳定性。

趣味解读

就像"分子钓鱼比赛"：GO扮演着智能渔网角色，表面活性剂是让鱼儿（适配体）松口的秘密武器，而高浓度靶标则是吸引目标鱼群的终极诱饵！