绿原酸联合5-氟尿嘧啶通过调控Wnt/β-catenin通路增强结直肠癌治疗效果的机制研究

针对结直肠癌(CRC)化疗耐药和Wnt/β-catenin通路异常激活的临床难题，研究人员创新性地探索了天然化合物绿原酸(CGA)与5-氟尿嘧啶(5-FU)的协同作用。研究发现该联合方案能显著抑制SW480和HT-29细胞活力，通过下调β-catenin/TCF7L2轴调控EMT标志物(CDH1/VIM)及耐药基因(ABCG2/SLC16A1)，为克服化疗耐药提供了新策略。

　　

在恶性肿瘤治疗领域，结直肠癌(CRC)始终是困扰医学界的重大挑战。全球范围内，其发病率高居第三，死亡率位列第二，每年夺走数十万生命。更棘手的是，临床一线药物5-氟尿嘧啶(5-FU)单药有效率仅10-15%，即便联合用药提升至40-50%，仍面临耐药性强、毒副作用大等瓶颈。究其根源，Wnt/β-catenin通路的异常激活不仅是CRC发生的"始作俑者"，更与肿瘤代谢重编程、转移扩散和化疗抵抗密切相关。

面对这一困境，来自哥伦比亚麦德林大都会技术研究所(Grupo de Investigación e Innovación Biomédica GI2B, Instituto Tecnológico Metropolitano)的Ana María Sepúlveda团队独辟蹊径，将目光投向咖啡中的天然多酚——绿原酸(CGA)。前期研究已揭示CGA具有调控Wnt通路的神奇潜力，但能否与化疗药物"强强联合"仍是未解之谜。为此，研究人员在《Phytomedicine》发表重要成果，首次系统阐释了CGA与5-FU协同抗CRC的作用机制。

研究采用MTT法检测细胞活力，流式细胞术分析周期分布，qRT-PCR和Western blot分别从转录和翻译水平评估Wnt通路关键分子(β-catenin/TCF7L2)及下游靶点(CCND1/JUN)，结合荧光显微技术观测β-catenin亚细胞定位，在SW480和HT-29两种APC突变型CRC细胞系中展开多维度验证。

CGA和5-FU共处理诱导SW480和HT-29细胞毒性

数据显示CGA单药使SW480细胞活力24h内降至50%，48h达20%，而5-FU单药效果有限(48h存活率80%)。两者联用产生显著协同效应，48h存活率仅20%。HT-29细胞中，CGA虽单药无效，但与5-FU联用仍使48h存活率显著降低。

细胞周期分布改变

流式分析揭示SW480细胞在联用后S期阻滞(从28%增至40%)，HT-29则出现G1期蓄积(从60%升至75%)，提示两株细胞响应机制的差异：前者可能因5-FU干扰DNA合成，后者则通过早期周期阻滞实现生长抑制。

Wnt/β-catenin通路组分mRNA表达变化

qRT-PCR显示联用显著下调β-catenin(CTNNB1)和TCF7L2表达，SW480中48h降幅达70%。EMT标志物呈现VIM下调、CDH1上调的"去恶性化"趋势。值得注意的是，耐药基因ABCG2在HT-29中显著降低，而代谢转运体SLC16A1在SW480中明显抑制。

β-catenin蛋白水平降低

Western blot证实联用组β-catenin蛋白表达减少60%，荧光显微显示其核移位受阻，从分子层面解释了联合治疗的靶向性机制。

这项研究开创性地揭示了天然多酚与化疗药物的协同抗癌机制：CGA如同"通路调节器"，精准抑制Wnt/β-catenin信号轴，使肿瘤细胞对5-FU敏感性倍增；又似"耐药逆转剂"，下调ABCG2泵减少药物外排；更扮演"代谢干扰者"，通过抑制MCT1破坏Warburg效应。这种多靶点作用模式不仅为克服CRC化疗耐药提供了新思路，更彰显了"天然化合物+化疗药"联合策略的临床转化潜力。

研究团队特别指出，两种细胞系对联合治疗的差异响应，映射出CRC分子分型对治疗方案选择的重要性。未来需在类器官模型和体内实验中验证该策略，并探索肠道菌群对CGA代谢的影响。这些发现为开发基于天然产物的精准辅助疗法奠定了重要理论基础，也为其他Wnt通路异常肿瘤的治疗提供了借鉴范式。