M-CSF诱导小鼠骨髓源性巨噬细胞的条件优化及其基于RNA-Seq的分子机制探索

为解决骨髓源性巨噬细胞(BMDM)在免疫与炎症研究中需求量大、成本高的问题，研究人员通过析因实验设计优化了M-CSF诱导条件（2×105 cells/cm2接种密度、80 ng/ml M-CSF诱导4天），使BMDM产率达75.6%，并通过RNA-Seq发现Cd4/Smad6等关键靶基因及MAPK/mTOR通路调控机制，为细胞治疗（如肝纤维化）提供高效经济方案。

　　

这项研究深入探索了巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导小鼠骨髓源性巨噬细胞(BMDM)的最优方案。通过精巧的析因实验设计，科研团队系统评估了骨髓细胞(BMC)接种密度、M-CSF浓度、诱导时长及骨髓驻留巨噬细胞清除等变量，最终锁定黄金组合：2×10⁵ cells/cm²接种密度配合80 ng/ml M-CSF刺激4天（期间第3天换液），不仅将BMDM产率提升至75.6%，还发现第4天诱导的细胞展现出最强吞噬能力（经中性红实验验证）。

更有趣的是，RNA测序(RNA-Seq)技术揭示了背后的分子密码——Cd4和Smad6等基因像精准的调控开关，分别掌管着BMDM的增殖与分化大权。而MAPK、mTOR这些细胞信号通路则如同高速公路网络，将TGF-β和NF-kappa B等关键信号分子快速传递到细胞核内。这些发现不仅为肝纤维化等疾病的细胞治疗提供了高性价比的巨噬细胞制备方案，更绘制了M-CSF调控造血干细胞命运的分子地图。