靶向IL-12/IL-17/PD-L1三联通路的新型溶瘤病毒CARG-2020在黑色素瘤和乳腺癌治疗中的突破性进展

本研究针对癌症免疫治疗响应率低的难题，通过基因工程改造的溶瘤病毒载体CARG-2020，同时靶向IL-12、IL-17RA和PD-L1三条关键免疫通路。研究人员证实该三价制剂通过静脉和瘤内注射均可显著抑制结直肠癌、黑色素瘤和三阴性乳腺癌生长，并首次揭示其疗效依赖于CD8+ T细胞活化。这项发表于《Scientific Reports》的研究为开发广谱抗癌疗法提供了新范式。

　　

癌症免疫治疗近年来虽取得突破，但仍有两大瓶颈亟待解决：一是现有疗法仅对部分患者有效，二是系统给药的毒性问题。以PD-1/PD-L1抑制剂为代表的免疫检查点阻断疗法面临"冷肿瘤"响应差的困境，而IL-12等细胞因子全身给药又存在严重毒副作用。更棘手的是，不同癌症类型对治疗的反应存在显著差异，亟需开发能同时调控多条免疫通路且安全递送的广谱抗癌平台。

美国康涅狄格大学健康中心（University of Connecticut Health Center）的Elham Ahmadi等研究者创新性地将病毒样囊泡(VLV)载体与三重免疫调节模块相结合，构建出新型溶瘤病毒制剂CARG-2020。该载体整合了：1）单链IL-12以激活Th1免疫；2）IL-17RA拮抗剂阻断促瘤炎症；3）靶向PD-L1的shRNA解除免疫抑制。研究团队通过静脉和瘤内两种给药途径，在结直肠癌MC38模型、B16黑色素瘤和PY8119三阴性乳腺癌(TNBC)模型中系统评估了其疗效，相关成果发表在《Scientific Reports》期刊。

关键技术包括：1）基于Semliki森林病毒和VSV-G糖蛋白构建自扩增RNA载体；2）流式细胞术分析肿瘤浸润淋巴细胞亚群；3）qRT-PCR检测Th1标志基因表达；4）抗体介导的CD4⁺/CD8⁺ T细胞耗竭实验；5）长期随访评估免疫记忆效应。

【CARG-2020通过系统给药有效抑制结肠癌】

静脉注射实验显示，虽然仅有2%的病毒颗粒能靶向肿瘤，但CARG-2020仍显著抑制MC38肿瘤生长，27%小鼠实现完全缓解。值得注意的是，单纯表达IL-12的载体在第三次给药即引发致死毒性，而CARG-2020可耐受至第五次注射，显示多价设计的安全性优势。

【T细胞依赖性抗肿瘤机制】

通过抗体耗竭实验证实，CD8⁺ T细胞是介导疗效的核心效应细胞——耗竭后肿瘤抑制率下降60%。流式分析显示治疗组肿瘤中IFN-γ⁺ CD8⁺ T细胞增加3倍，伴随Granzyme B、PD-1等激活标志物上调。

【黑色素瘤模型的持久免疫记忆】

在B16模型中，六次瘤内注射使33%小鼠肿瘤完全消退。重要的是，这些"治愈"小鼠在101天后再次接种肿瘤时仍保持完全抵抗，而对照组全部形成肿瘤。qPCR显示治疗组肿瘤中Th1相关基因(IFN-γ、TNF-α等)表达显著升高。

【突破TNBC治疗困境】

相比PD-1单抗无效的结果，CARG-2020使三阴性乳腺癌生长延缓50%，生存期显著延长。机制上，该治疗成功将"冷肿瘤"转化为免疫活性状态，表现为CD8⁺ T细胞浸润增加和免疫检查点分子协同上调。

这项研究的重要意义在于：1）首次证实三通路协同靶向可克服单药耐药；2）建立静脉给药可行性框架；3）为手术可及肿瘤提供局部治疗新选择。特别是针对PD-1抑制剂无效的TNBC，CARG-2020通过IL-12的"加热"作用与PD-L1抑制形成互补，这种"免疫激活+检查点解除"的双轨策略具有重要转化价值。未来研究可探索VSV-G糖蛋白改造以增强肿瘤靶向性，或与LAG3抑制剂联用进一步提升疗效。