Collectin-11通过EGFR/TGF-βRII激活促纤维化信号通路驱动肾纤维化的机制研究

本文揭示了Collectin-11（CL-11）通过结合表皮生长因子受体（EGFR）和转化生长因子-β受体II（TGF-βRII），激活ERK/AKT/mTOR/STAT3/SMAD2信号通路，显著促进肾脏成纤维细胞增殖、细胞外基质（ECM）合成及促炎因子分泌，为肾纤维化治疗提供新靶点。

　　

Introduction

Collectin-11（CL-11）作为C型凝集素家族新成员，在肾脏高表达并参与纤维化进程。既往研究显示其能刺激黑色素瘤细胞增殖，但对肾脏成纤维细胞功能调控机制尚不明确。本研究聚焦CL-11通过受体介导的信号网络调控肾纤维化的分子机制。

Methods and materials

采用原代小鼠肾皮质成纤维细胞（vimentin⁺/FN⁺纯度>95%）及人源细胞模型，通过EdU染色、Western blot（WB）和流式细胞术检测增殖；qRT-PCR分析ECM相关基因（Fn1、Col1a1）及炎症因子（Il-6、Tnfα）；分子对接（HDOCK服务器）预测CL-11与EGFR/TGF-βRII相互作用；siRNA敲降验证受体功能。

Results

1. CL-11刺激肾成纤维细胞增殖

   rCL-11（600 ng/ml）处理48小时使EdU⁺细胞比例增加2.3倍（p<0.0001），PCNA蛋白表达上调1.8倍，S期细胞占比从18.7%升至31.4%（p<0.05）。

2. ECM与炎症因子调控

   rCL-11显著提升纤维连接蛋白（FN）和I型胶原（COL-I）的mRNA（分别增加2.1倍和1.7倍）及蛋白水平，同时诱导IL-6、TGF-β1等促纤维化因子分泌（p<0.005）。

3. 信号通路激活

   15分钟刺激即可触发ERK（Thr202/Tyr204）、AKT（Ser473）、STAT3（Tyr705）和SMAD2（Ser465/467）磷酸化，呈现剂量依赖性（300-600 ng/ml）。

4. 受体互作机制

   免疫荧光显示CL-11与EGFR/TGF-βRII共定位（置信度>0.8）。分子对接揭示CL-11-EGFR复合物形成4个氢键（如Glu240/Ser306）和盐桥（Glu240/His304），而CL-11-TGF-βRII存在3个氢键（如Arg220/Leu106）。siRNA敲低任一受体均使CL-11促增殖效应消失（p<0.05）。

Discussion

研究首次阐明CL-11通过"双受体-多通路"协同机制驱动肾纤维化：

• 结构基础：CL-11三聚体CRD结构域与EGFR/TGF-βRII特异性结合；

• 功能效应：激活AKT/mTOR促增殖通路与SMAD2促纤维化通路形成正反馈；

• 临床转化：人源细胞实验证实该机制跨物种保守性，为靶向CL-11-受体轴治疗慢性肾病提供依据。

创新性发现

发现L-岩藻糖（L-fucose）可竞争性抑制CL-11与成纤维细胞结合（p<0.005），提示糖类衍生物或成潜在抑制剂。