儿童胚胎性横纹肌肉瘤的临床病理特征与分子遗传学整合研究：单中心靶向测序与染色体微阵列分析

本研究针对儿童胚胎性横纹肌肉瘤（ERMS）的分子机制与临床预后关联性展开深入探索。研究人员通过整合临床病理特征分析、OncoKids?靶向测序和染色体微阵列（CMA）技术，在15例ERMS病例中发现MAP2K1和PPM1D新突变，首次报道CBL种系突变与软骨分化的关联，并揭示2号染色体整体增益（64.3%）的高频特征。特别值得注意的是，CDKN2A/B与TP53共缺失病例呈现弥漫性间变特征和不良预后，为ERMS分子分型与精准治疗提供了新依据。

　　

横纹肌肉瘤作为儿童最常见的软组织肉瘤，其胚胎型亚型（ERMS）占70-75%，但分子机制与临床预后的关联仍存在重大知识缺口。尽管已知RAS通路突变（如NRAS、HRAS）和11p15.5区域异常在ERMS中常见，但MAP2K1、PPM1D等新突变的临床意义，以及染色体2号整体增益等拷贝数变异的预后价值尚不明确。更关键的是，TP53突变与间变特征的分子关联、异源软骨分化的遗传基础等特殊表型的机制亟待阐明。

来自美国洛杉矶儿童医院（Children's Hospital Los Angeles）和南加州大学凯克医学院的研究团队，在《Virchows Archiv》发表了这项整合性研究。团队采用多组学方法，对15例ERMS病例进行临床病理特征分析、OncoKids?靶向测序（覆盖82个癌基因热点和1421种融合基因）和染色体微阵列分析。研究特别关注分子变异与组织学特征（如间变、软骨分化）的关联，并通过41个月的中位随访验证临床意义。

关键技术方法包括：1）基于FFPE样本的靶向测序（OncoKids? panel）检测体细胞突变和融合基因；2）染色体微阵列（Affymetrix OncoScan）分析拷贝数变异和杂合性缺失；3）针对CBL突变的Sanger测序验证种系变异；4）免疫组化评估Desmin、MyoD1和myogenin表达模式。

分子遗传学特征

研究发现NRAS、FGFR4和CTNNB1基因存在复发性突变（各3例），同时首次在ERMS中鉴定出MAP2K1（p.Phe53Cys）和PPM1D（p.Gln524Ter）新突变。值得注意的是，携带CBL种系突变（p.Gln367Pro）的病例出现异源软骨分化，这为DICER1非依赖型软骨分化机制提供了新线索。

染色体异常模式

染色体微阵列揭示2号染色体整体增益率达64.3%（9/14），显著高于既往报道的9.1%。其他高频变异包括X染色体整体缺失（28.6%）和4p16.3q35.2区段LOH（21.4%）。特别具有临床意义的是，同时存在CDKN2A/B纯合缺失和TP53缺失的病例（Case 9）表现出弥漫性间变、超高有丝分裂指数（>100MF/10 HPF）和快速进展的临床过程。

临床病理关联

免疫组化证实Desmin敏感性达100%，而myogenin阴性病例占6.7%。分子-预后分析显示，80%病例无病生存，但TP53/CDKN2A/B共缺失病例在15个月内死亡，支持将此类变异纳入COG（Children's Oncology Group）危险度分层体系。

这项研究通过多维度数据整合，首次建立MAP2K1/PPM1D突变与ERMS的关联，揭示CBL突变可能导致特殊分化表型，并证实2号染色体增益是该肿瘤的分子标志。更重要的是，CDKN2A/B-TP53共缺失作为间变型和不良预后的分子特征，为临床治疗决策提供了新依据。这些发现不仅扩展了ERMS的分子图谱，也为开发靶向RAS-MAPK通路和细胞周期调控的治疗策略奠定了理论基础。