C10ORF99（GPR15L）通过GPR15非依赖机制增加结肠炎及结肠炎相关癌症易感性：揭示肠道屏障修复与T细胞迁移的双重调控

本研究针对炎症性肠病（IBD）治疗靶点GPR15及其配体C10ORF99的未明确功能展开探索。研究人员通过构建基因敲除小鼠模型，首次证实C10ORF99是介导T细胞向大肠迁移的GPR15非冗余配体，同时发现其通过GPR15非依赖途径抑制肠上皮增殖，加剧DSS诱导的结肠炎及结肠炎相关癌症（CAC）。该研究为IBD治疗提供了新靶点，并揭示肠道屏障修复与免疫调控的交叉机制，发表于《Mucosal Immunology》。

　　

炎症性肠病（IBD）是全球范围内发病率持续上升的慢性炎症性疾病，其中溃疡性结肠炎（UC）的特征性病变集中于大肠黏膜。尽管现有生物制剂如抗TNF抗体已应用于临床，但仍有大量患者治疗无效。GPR15作为大肠特异性T细胞归巢受体，其配体C10ORF99（又称GPR15L）在皮肤炎症中的作用已被报道，但二者在肠道稳态中的作用机制尚不明确。更关键的是，既往研究未能区分C10ORF99的GPR15依赖与非依赖功能，这严重制约了其作为治疗靶标的开发潜力。

美国托马斯杰斐逊大学（Thomas Jefferson University）微生物与免疫学系的研究团队通过多维度实验揭示了C10ORF99的双重功能。首先通过RNA测序筛选出大肠内皮特异性表达的C10ORF99，β-抑制素报告实验和Transwell迁移实验证实其特异性激活GPR15的能力。利用竞争性T细胞归巢实验，研究人员首次在体内证明C10ORF99缺失导致GPR15⁺ T细胞向大肠迁移减少，与GPR15敲除表型一致。更具突破性的发现是，在GPR15/C10ORF99双敲除（DKO）小鼠中，DSS诱导的结肠炎严重程度显著低于GPR15单敲除（SKO）小鼠，表现为体重无下降、结肠隐窝结构完整且通透性未增加。这种保护作用与上皮增殖加速相关：EdU标记实验显示DKO小鼠隐窝基底细胞增殖率提高，48小时脉冲追踪实验中EdU⁺细胞迁移距离更长。类器官培养实验进一步证实，C10ORF99缺失使LGR5⁺肠道干细胞形成的类器官直径增大，而添加重组C10ORF99可逆转该表型，说明其抑制增殖的作用具有细胞自主性。在AOM/DSS结肠癌模型中，DKO小鼠肿瘤数量减少且高级别腺瘤比例降低，提示C10ORF99通过促进炎症微环境加剧癌变。

关键技术包括：1）构建C10ORF99基因敲除与GPR15/C10ORF99双敲除小鼠模型；2）采用RNA测序筛选内皮特异性配体；3）β-抑制素报告系统验证配体-受体互作；4）竞争性T细胞归巢实验；5）DSS/TNBS结肠炎模型与AOM/DSS结肠癌模型；6）类器官培养与EdU脉冲追踪技术。

研究结果部分：

C10ORF99是大肠中GPR15的非冗余配体

通过比较大肠、小肠和淋巴结内皮细胞转录组，发现仅C10ORF99符合大肠特异性表达标准（>4倍差异）。体内竞争性归巢实验显示，GPR15⁺ T细胞在C10ORF99杂合小鼠中迁移效率是对照组的10倍，而在C10ORF99敲除小鼠中该优势消失。

C10ORF99缺失通过GPR15非依赖途径抵抗结肠炎

DKO小鼠在DSS处理后体重保持稳定，结肠长度缩短程度轻于SKO小鼠，且隐窝结构完整。这种保护作用与上皮增殖加速相关，而TNBS（免疫介导结肠炎）模型中未观察到差异，说明C10ORF99主要影响上皮修复而非免疫应答。

C10ORF99抑制肠上皮干细胞增殖

DKO小鼠大肠隐窝长度增加，EdU⁺细胞数量增多。类器官实验证实该表型不依赖微生物群或免疫细胞，重组C10ORF99可抑制敲除类器官的生长。

C10ORF99加剧结肠炎相关癌症

AOM/DSS模型中，SKO小鼠肿瘤数量是DKO的2倍，且高级别腺瘤占比更高，表明C10ORF99通过促进炎症-癌变转化驱动肿瘤发生。

讨论部分强调：该研究首次解析C10ORF99的双重功能——既作为GPR15配体调控T细胞迁移，又独立抑制上皮修复。这为IBD治疗提供新思路：靶向C10ORF99可同时阻断致病性T细胞浸润并加速屏障修复。值得注意的是，人类GPR15⁺ T细胞以效应T细胞为主，与小鼠以调节性T细胞（Treg）为主的分布不同，提示物种差异需在临床转化中充分考虑。未来需探索C10ORF99调控干细胞静息的分子机制，以及在非炎症性结肠癌模型中的作用。