A3结构域有害变异聚集与血友病A伴抑制物患者的分子机制研究及临床意义

本研究针对血友病A（HA）患者抑制物（INH+）形成机制，通过FVIII基因（F8）全谱变异分析，首次在混血人群中发现A3结构域变异与抑制物显著相关（P < 0.001），揭示Inv22使初治患者抑制物风险增加4.8倍（OR 4.81），而错义变异具有保护作用（OR 0.09），为低免疫原性FVIII药物设计提供新靶点。

　　

血友病A（Haemophilia A, HA）作为一种X染色体连锁的出血性疾病，其核心病因是凝血因子VIII（FVIII）基因（F8）变异。尽管欧美人群的F8变异谱已有较充分研究，但混血人群的基因特征与抑制物（中和性抗体）形成的关联仍是未解难题。更棘手的是，约30%的重型HA患者会在替代治疗后产生抑制物，导致治疗失败和出血风险骤增。

巴西米纳斯吉拉斯联邦大学的研究团队对265例重型HA患者展开多维度研究。通过定制化基因panel和全外显子组测序（whole exome sequencing），结合内含子1/22倒位（Inv22）基因分型，首次系统描绘了拉丁美洲混血人群的F8变异图谱。研究发现98.1%的患者携带明确致病变异，其中33%为全球首次报道。

关键技术包括：1）采用高通量测序技术检测F8基因变异；2）建立巴西人群特异性变异数据库；3）通过多变量logistic回归分析抑制物风险因素。

主要发现：

1. 1.

   变异分布特征

   Inv22（48.3%）、无义变异（14.7%）和小插入缺失（11.3%）构成主要变异类型。值得注意的是，A3结构域变异在抑制物阳性组（INH+）占比高达21%，而抑制物阴性组（INH-）为零（P < 0.001）；相反，A1结构域变异在INH-组更常见（33.3% vs 7.7%）。

2. 2.

   风险预测模型

   内含子22倒位使初治患者抑制物风险提升4.8倍（OR 4.81, 95%CI 2.02-12.01），而错义变异展现出显著保护效应（OR 0.09, 95%CI 0.01-0.50）。这种"双刃剑"现象提示FVIII分子特定区域的免疫原性存在根本差异。

3. 3.

   结构-功能关联

   A3结构域（含FVIII重链C端）是FVIII与von Willebrand因子（VWF）结合的关键区域，该区域变异可能导致蛋白构象改变，暴露隐藏表位触发免疫应答。这解释了为何A3变异患者更易产生抑制物。

这项研究突破性地证实：F8基因型与抑制物发展存在明确的域特异性（domain-specific）关联，为开发低免疫原性FVIII制剂提供了精准的分子改造靶点。特别是A3结构域的免疫原性"热点"特征，提示未来工程化FVIII应优先修饰该区域。此外，建立混血人群特异性变异谱，弥补了现有数据库的种族多样性不足，对全球HA精准诊疗体系的完善具有里程碑意义。论文发表于血栓与止血领域权威期刊《Research and Practice in Thrombosis and Haemostasis》。