综述：打破CREB-CBP联盟：小分子和多肽破坏pKID-KIX相互作用的研究进展、挑战与治疗前景

这篇综述系统梳理了转录因子CREB与其辅激活因子CBP/p300通过pKID-KIX结构域相互作用在肿瘤发生中的关键作用，重点介绍了从早期微摩尔级萘酚类抑制剂（KG-501）到纳摩尔级萘甲酰胺类化合物（666-15）及稳定肽模拟物的研发突破，揭示了通过靶向这一"不可成药"蛋白-蛋白相互作用界面（PPI）治疗癌症和代谢疾病的转化潜力。

　　

KIX架构及其两个配体结合沟槽

CBP的KIX结构域（残基586-672）形成三螺旋束（α1-α3），其表面存在两个独立的配体结合位点：pKID/c-Myb沟槽由α1的N端（L599、L603）和α3中段（Y650、A654等）构成，而MLL结合位点位于α1-α3交界处。冷冻电镜显示这两个位点可通过变构效应相互影响，为多靶点抑制剂设计提供了结构基础。

生化结合检测技术

传统GST pull-down实验（如KG-501的K_i≈90 μM）正逐渐被荧光偏振（FP）、表面等离子共振（SPR）和细胞内双分子荧光互补（BiFC）等新技术替代。特别值得注意的是¹⁹F-NMR配体性图谱技术，它能动态追踪KIX结构波动揭示的瞬时结合口袋。

第一代萘酚支架：KG-501

2004年通过NMR筛选发现的KG-501开创性地证明KIX的可药性。该分子结合在α1螺旋附近的变构通道（Arg-600区域），虽仅微摩尔级活性，但能通过扰动c-Myb结合网络间接削弱pKID结合，在10 μM浓度下即可抑制CREB报告基因活性。

分子动力学视角下的折叠-绑定耦合

超过30 μs的原子级模拟揭示了pKID与KIX结合的动态过程：无序的pKID先形成约18%的螺旋结构，跨越3 kcal mol^-1能垒后正确对接，最终在KIX支架上完成折叠。关键残基K136的突变可使结合亲和力降低100倍，证实螺旋稳定性对相互作用的决定性影响。

抗肿瘤效果的临床前证据

明星化合物666-15在TNBC异种移植模型中（10 mg kg^-1腹腔注射）展现显著抑瘤效果，其通过阻断CREB依赖的代谢重编程（如降低GLUT1表达）选择性杀伤KRAS突变肺癌细胞。值得注意的是，CREB基因敲除虽导致小鼠围产期死亡，但药理抑制却表现出良好耐受性，揭示治疗窗口的存在。

药物化学优化策略

针对666-15水溶性差（<100 μM）的缺陷，磷酸前药策略将口服生物利用度提升至38%。而基于氟代硫醚稳定的螺旋肽则实现了皮摩尔级亲和力，其特殊的3??螺旋构象能精确模拟pKID的αB螺旋。

未来方向

领域内正探索蛋白降解靶向嵌合体（PROTAC）技术，拟将KIX配体与E3连接酶配体偶联；同时机器学习辅助的分子动力学（如MetaD预测）正在加速变构抑制剂的虚拟筛选。这些进展共同推动CREB-CBP相互作用抑制剂向首个临床研究迈进。