纳米结构脂质载体负载木瓜籽苯甲异硫氰酸酯增强抗白色念珠菌感染的体外和体内疗效研究

这篇研究通过纳米结构脂质载体（NLC）负载苯甲异硫氰酸酯（BITC），显著提升了其抗白色念珠菌（C. albicans）的稳定性与疗效。实验证明，BITC-NLC对敏感及耐药菌株的抑制效果优于游离BITC和氟康唑（FLC），并通过小鼠系统性念珠菌病模型验证了其增强生存率、降低真菌负荷及减轻器官损伤的能力，为耐药性真菌感染提供了新型治疗策略。

　　

Abstract

白色念珠菌（C. albicans）是条件性致病真菌，免疫低下人群易引发系统性感染。氟康唑（FLC）等唑类药物的长期使用导致耐药性加剧，临床治疗面临挑战。研究团队此前从木瓜（Carica papaya L.）籽中提取的苯甲异硫氰酸酯（BITC）虽具显著抑菌效果，但其不稳定性、水溶性差等缺陷限制了应用。本研究通过熔融乳化超声法制备BITC-NLC，解决了上述问题，并显著提升了抗真菌疗效。

材料与方法

材料：木瓜籽精油（BITC纯度99.4%）、单甘酯、辛酸甘油酯等。菌株：标准株SC5314及5株临床分离株（含FLC耐药株N56）。制备工艺：将脂质相（单甘酯/辛酸甘油酯/BITC）与水性相（泊洛沙姆188/大豆卵磷脂）混合乳化，超声处理后冷却过滤。表征：透射电镜显示BITC-NLC呈球形（粒径79.21±1.27 nm），zeta电位-22.147 mV，包封率达95.32%。活性评价：通过微量稀释法测定最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MFC），并构建系统性念珠菌病小鼠模型（腹腔注射环磷酰胺后尾静脉接种N56菌株）。

结果

体外活性：BITC-NLC对敏感及耐药株的MIC值均低于游离BITC（如对N56的MIC为32 μg/mL vs. 128 μg/mL），且优于FLC对耐药株的效果（>64 μg/mL）。生长动力学曲线显示，16 μg/mL BITC-NLC即可完全抑制敏感株生长。体内疗效：BITC-NLC（10 mg/kg）组小鼠存活率达100%，显著高于BITC（66.67%）和FLC（50%）；脾脏指数升高，肾脏真菌负荷（log₁₀ CFU/g）降低；HE和PASM染色显示肾脏病理损伤（如肾小管结构模糊、黑色菌落）明显改善。

讨论

相比既往环糊精包合技术，NLC制备更快捷且无需有机溶剂。BITC-NLC通过缓释和保护活性成分，增强了对线粒体功能（如降低膜电位）和细胞壁结构的破坏作用。值得注意的是，BITC-NLC对耐药菌的抑制效果超越FLC，可能与其多靶点机制（如诱导活性氧生成）相关。毒性研究表明，2.5-10 mg/kg剂量对小鼠无不良反应。

结论

BITC-NLC作为一种新型纳米制剂，可显著提升木瓜籽提取物的抗真菌效果，尤其针对耐药性白色念珠菌感染，为临床治疗提供了潜在解决方案，同时拓展了木瓜副产物的应用价值。研究符合ARRIVE 2.0指南，经海南医学院伦理委员会批准（HYLL-2024-165）。