单细胞RNA测序揭示周细胞获得纤维化表型并促进克罗恩病肠系膜脂肪组织纤维化

这篇研究通过单细胞RNA测序技术，首次系统揭示了克罗恩病（CD）特征性病变"爬行脂肪"（CF）中周细胞（pericytes）的纤维化表型转化机制。研究发现肠系膜脂肪组织（MAT）中周细胞通过上调COL3A1等19种ECM基因表达，驱动组织纤维化进程，并与相邻肌层增厚显著相关。该研究为CD相关纤维化提供了新的治疗靶点（如STEAP4+周细胞亚群），对理解CD病理机制具有重要价值。

　　

Abstract

研究团队通过整合23对CF和CD-MAT样本的转录组数据及单细胞测序（scRNA-seq），发现克罗恩病患者肠系膜脂肪组织存在渐进性纤维化特征。核心ECM基因COL3A1在CD-MAT和CF中显著上调，且纤维化程度与肌层厚度呈正相关。

Patients and Methods

采用组织病理学分析83例人类MAT样本（15 H-MAT、34 CD-MAT和34 CF），结合GSE227376等公共数据集。通过磁珠分选技术分离MCAM⁺CD36⁺周细胞，并用TGF-β1刺激验证其纤维化表型转化。

Results

1. 1.

   组织学特征：Masson染色显示CF的胶原体积分数（CVF）较H-MAT增加3.2倍，血管周围ECM沉积显著。

2. 2.

   单细胞图谱：60,168个SVF细胞聚类分析鉴定出13个亚群，周细胞和MSCs表现出最高ECM评分（P<0.0001）。

3. 3.

   周细胞异质性：

   • •

     发现STEAP4⁺周细胞新亚群，其ECM相关基因表达量是VSMCs的1.8倍

   • •

     伪时序分析揭示周细胞分化为纤维化表型（Fate1）或VSMCs（Fate2）的双向轨迹

4. 4.

   体外验证：TGF-β1刺激使原代周细胞的COL3A1表达上调4.3倍（P<0.001），免疫荧光显示胶原纤维环绕STEAP4⁺细胞。

Discussion

该研究首次阐明：

1. 1.

   CD-MAT作为H-MAT向CF转化的中间状态存在中度纤维化

2. 2.

   周细胞通过PDGFRβ/ALK5-Smad2/3通路参与血管重塑与纤维化的偶联

3. 3.

   STEAP4可作为周细胞特异性标记物用于靶向治疗

Conclusion

研究证实周细胞在CF中通过获得纤维化表型成为驱动MAT纤维化的关键基质细胞群体，为CD治疗提供了新的干预靶点。需进一步通过谱系追踪模型验证周细胞在血管发育和纤维化中的精确作用机制。