嵌合抗HLA抗体受体工程化调节性T细胞抑制预致敏移植受者同种异体抗原特异性B细胞的研究

这篇研究开创性地构建了靶向HLA-A2的嵌合抗HLA抗体受体（CHAR）工程化调节性T细胞（Tregs），通过特异性识别预致敏患者B细胞表面的抗HLA-A2抗体，显著抑制IgG分泌而不影响Treg稳定性（FOXP3+HELIOS+表型）。该策略为器官移植脱敏提供了精准免疫干预新思路，有望解决25%欧美肾移植患者面临的HLA-A2错配难题。

　　

Introduction

器官移植领域面临的核心挑战是20%首次移植和75%二次移植患者存在抗人类白细胞抗原（HLA）抗体。其中HLA-A2作为高频错配位点（占欧美肾移植25%），其致敏患者面临供体器官匹配困难、抗体介导排斥（AMR）和慢性排斥风险。现有脱敏方案（如利妥昔单抗）非特异性清除B细胞导致感染等副作用。研究团队另辟蹊径，利用具有免疫抑制特性的调节性T细胞（Tregs），通过基因工程赋予其靶向抗HLA-A2 B细胞的嵌合受体（CHAR），该受体由HLA-A2胞外域与CD28-CD3ζ胞内信号域构成。

Materials and methods

技术路线包含三大创新模块：

1. 1.

   分子构建：采用慢病毒载体表达HLA-A*02010101序列与NGFRt报告基因

2. 2.

   细胞制备：从HLA-A2阴性供体分选CD4⁺CD25^hiCD127^low Tregs，经CD3/CD28磁珠激活后以MOI=3转导

3. 3.

   功能验证：

   • •

     激活实验：与抗HLA-A2杂交瘤PA2.1共培养，通过CD69/CD71/CD25上调评估特异性激活

   • •

     细胞毒性：LDH法比较CHAR Tregs与CHAR Teff对靶细胞的杀伤差异

   • •

     临床样本测试：使用HLA-A2致敏患者PBMCs，通过ELISA检测IgG分泌抑制

Results

关键发现呈现递进式证据链：

1. 1.

   特异性激活：CHAR Tregs仅在与PA2.1共培养时激活（CD69⁺细胞增加3.2倍，p<0.001），且NGFRt⁺群体扩增5倍

2. 2.

   表型稳定：激活后FOXP3 MFI提升58%（p<0.01），且HELIOS表达维持，证实CHAR信号不诱导Treg去分化

3. 3.

   非细胞毒性：与CHAR Teff相比，CHAR Tregs的LDH释放量降低72%（p<0.001）

4. 4.

   临床相关性：在2/3致敏患者中，CHAR Tregs使IgG分泌降低64-82%（48小时数据，p<0.01）

5. 5.

   机制线索：UMAP分析显示CHAR Tregs高表达抑制分子CD27（86%⁺）和CD38（94%⁺），且CD71 MFI增加3.5倍

Discussion

研究突破体现在三方面：

1. 1.

   策略创新：首次将CHAR概念拓展至Tregs领域，相比CAAR-T细胞更侧重免疫调节而非清除

2. 2.

   临床价值：解决移植领域两大痛点——HLA致敏患者等待时间延长（平均>5年）和AMR导致的移植物失功

3. 3.

   技术优势：

   • •

     靶向精度：通过B细胞表面膜结合型IgG识别，避免可溶性抗体干扰

   • •

     安全边际：保留Tregs天然免疫调节特性，无Teff的细胞因子风暴风险

未来需探索CHAR Tregs在记忆B细胞（CD27⁺IgD^-）和浆细胞（CD38^hiCD27^hi）亚群的差异调控，以及IL-10/TGF-β在抑制中的相对贡献。该平台技术可延伸至其他HLA型别（如HLA-B27）和自身免疫病领域，为精准免疫治疗开辟新范式。