YES1通过调控PI3K/AKT通路抑制宫颈癌细胞凋亡与自噬的机制研究

本研究针对宫颈癌(CC)治疗中靶点缺失的临床难题，揭示了酪氨酸激酶YES1通过PI3K/AKT信号轴调控细胞凋亡与自噬的新机制。研究人员通过TCGA数据库分析结合体外实验证实，YES1在CC组织中高表达且与不良预后相关，其敲降可显著抑制SiHa/HeLa细胞增殖、迁移侵袭能力，同时激活LC3II/I-Beclin-1自噬通路及Bax-Caspase-3凋亡通路。该发现为CC的靶向治疗提供了潜在新靶点，论文发表于《Discover Oncology》。

宫颈癌作为威胁女性生殖健康的重大疾病，尽管HPV疫苗已广泛应用，但晚期患者的治疗仍面临转移复发和耐药性等严峻挑战。现有研究表明，非受体酪氨酸激酶YES1在多种肿瘤中扮演致癌角色，但其在宫颈癌中的具体机制仍是未解之谜。锦州医科大学附属第一医院的研究团队通过多维度实验，首次系统揭示了YES1通过PI3K/AKT通路双向调控宫颈癌细胞凋亡与自噬的分子机制，为突破临床治疗瓶颈提供了理论依据。

研究采用TCGA数据库生物信息学分析、免疫组化(IHC)和Western blot验证YES1表达特征，通过siRNA基因沉默技术构建YES1敲降模型。关键实验包括CCK-8增殖检测、Transwell迁移侵袭实验、流式细胞术凋亡分析，并结合自噬标志蛋白(LC3II/I、p62、Beclin-1)和凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3)的Western blot检测，系统评估YES1对PI3K/AKT通路的调控作用。

3.1 YES1表达与预后

TCGA数据分析显示YES1在宫颈癌组织显著高表达(P<0.05)，且高表达患者总体生存率更低(P<0.05)。IHC证实YES1主要定位于细胞膜/质，癌组织染色强度明显高于正常宫颈(P<0.001)。Western blot显示人正常宫颈上皮细胞HcerEpic中YES1表达量显著低于SiHa(HPV16+)和HeLa(HPV18+)细胞系(P<0.01)。

3.2 YES1敲降效率验证

通过三组siRNA序列转染筛选，确定SiHa细胞中YES1-si1/2和HeLa细胞中YES1-si1/3敲降效果最佳(P<0.0001)，Western blot和RT-qPCR显示YES1蛋白/mRNA水平下降80%以上。

3.3 恶性表型抑制

CCK-8实验显示YES1敲降后细胞增殖活力下降(P<0.0001)；克隆形成实验显示集落数减少50%以上(P<0.0001)；划痕实验显示迁移率降低(P<0.01)；Transwell实验证实侵袭穿膜细胞数减少(P<0.01)。

3.4 凋亡与自噬激活

流式细胞术显示YES1敲降组凋亡率升高2-3倍(P<0.01)。Western blot检测到促凋亡蛋白Bax、Cleaved Caspase-3上调，抗凋亡蛋白Bcl-2下调；自噬标志物LC3II/I比值增加、Beclin-1升高而p62降解(P<0.01)。

3.5 通路机制解析

PI3K/AKT通路关键蛋白检测显示，YES1敲降显著抑制PI3Kp85α和AKT^Ser473磷酸化水平(P<0.01)，但不影响总蛋白表达，证实其通过该通路调控细胞命运。

这项研究首次阐明YES1在宫颈癌中的双重调控机制：一方面通过PI3K/AKT通路维持细胞存活信号（上调Bcl-2、抑制Caspase-3），另一方面通过抑制自噬体形成（降低LC3II/I、增加p62）促进肿瘤进展。临床意义在于：①YES1可作为预后生物标志物；②其小分子抑制剂或与现有化疗/放疗产生协同效应；③为克服HPV阴性宫颈癌的治疗抵抗提供新思路。未来需开展体内实验验证，并探索YES1与其他SRC家族激酶的交叉调控关系。