靶向VCAM-1的CAR-Treg细胞疗法：腹主动脉瘤免疫治疗新突破

本研究针对腹主动脉瘤(AAA)缺乏有效非手术疗法的临床困境，创新性设计靶向血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的嵌合抗原受体调节性T细胞(CAR-Treg)疗法。通过单细胞测序揭示AAA患者Treg细胞功能缺陷，构建特异性识别VCAM-1的CAR-Treg细胞，在动物模型中证实其可精准归巢至瘤体部位，显著抑制炎症浸润（CD3+细胞减少41%）、延缓主动脉扩张（直径缩小33%），为AAA提供首个靶向免疫治疗方案。

　　

腹主动脉瘤(AAA)如同潜伏在血管系统的"定时炸弹"，其病理特征表现为腹主动脉不可逆的扩张，一旦破裂死亡率高达80%。目前临床治疗主要依赖开放手术和腔内修复，但约40%患者因合并症无法耐受手术，而药物治疗进展数十年来几乎停滞不前。更棘手的是，AAA发病机制中持续的炎症反应会招募大量免疫细胞浸润血管壁，导致血管平滑肌细胞凋亡、弹性纤维断裂——这种恶性循环恰似"火上浇油"，却缺乏精准的干预手段。

中国医科大学附属第一医院血管外科团队在《Communications Biology》发表的研究中，独辟蹊径地将抗癌领域明星技术CAR-T（嵌合抗原受体T细胞）改造应用于AAA治疗。研究人员通过分析8例AAA患者和6例健康对照的单细胞转录组数据，首次发现AAA患者调节性T细胞(Treg)存在"双缺陷"现象：数量减少50%的同时，关键免疫抑制因子IL-10和TGF-β分泌能力下降70%。这解释了为何AAA血管壁会成为CD4⁺T细胞和巨噬细胞的"炎症战场"。

研究团队创造性设计靶向VCAM-1（血管内皮和平滑肌激活标志物）的CAR-Treg细胞，犹如为"免疫警察"配备精准导航系统。通过7例患者样本验证显示，VCAM-1在AAA血管壁表达量激增3倍，且与MMP-9（基质金属蛋白酶）呈正相关。在Rag1^-/-小鼠模型中，注射CAR-Treg细胞14天后，活体成像显示60%细胞精准定位于瘤体，而普通Treg仅20%到达目标。更令人振奋的是，治疗组主动脉直径较对照组缩小33%，弹性纤维断裂减少62%，凋亡平滑肌细胞下降45%，这些数据均达到统计学显著水平。

关键技术包括：1）从8例AAA手术标本和6例正常主动脉中获取42,287个细胞进行单细胞RNA测序；2）采用慢病毒载体转染构建VCAM-1特异性CAR-Treg；3）建立Rag1^-/-小鼠弹性酶诱导AAA模型；4）DIR荧光标记结合小动物活体成像追踪细胞分布；5）多组学分析涵盖转录因子调控网络（FOXP3/STAT1/IRF1）、细胞通讯（IL16-SELPLG-MHCII通路）和蛋白表达谱。

Treg细胞通讯与转录因子动态特征

单细胞测序揭示AAA患者血液与组织中Treg比例较健康人降低50%，且丧失关键免疫抑制功能。细胞通讯分析显示其MHC-II和IL16通路异常激活，而转录因子FOXP3活性下降，EZH2（表观遗传调控因子）异常高表达，形成"功能耗竭"状态。

VCAM-1作为治疗靶点的验证

生物信息学分析发现VCAM-1与Treg浸润呈强负相关（r=-0.82）。免疫组化证实AAA患者血管壁VCAM-1表达量升高3.5倍，且与炎症程度正相关。动物实验显示VCAM-1主要定位于活化的平滑肌细胞而非内皮细胞。

CAR-Treg细胞的功能维持

体外实验证实转染CAR后Treg仍保持正常IL-10（152±18 pg/ml）和TGF-β（89±11 pg/ml）分泌能力，增殖曲线与野生型无差异。关键转录因子FOXP3表达量未受载体转染影响。

体内治疗效果评估

CAR-Treg治疗组较普通Treg组表现出三大优势：1）靶向效率提升3倍；2）炎症因子IL-17a降低58% vs 32%；3）血管重塑指标α-SMA升高2.1倍 vs 1.3倍。Western blot显示凋亡相关蛋白BAX和Caspase-3表达量分别下降67%和54%。

这项研究开创性地将CAR技术应用于血管疾病领域，其意义远超AAA治疗本身。首先，VCAM-1-CAR-Treg的设计思路为动脉粥样硬化、血管炎等炎症性血管病变提供新范式；其次，证实表观遗传调控因子EZH2可能是逆转Treg功能耗竭的新靶点；最后，建立的"单细胞图谱-靶点验证-精准治疗"研究框架，为其他器官纤维化疾病研究提供方法论参考。值得注意的是，该疗法在免疫缺陷小鼠模型中展现的安全性优势（未观察到细胞因子风暴），为其临床转化奠定基础，但长期疗效仍需在更接近人类免疫系统的ApoE^-/-模型中验证。