纳米酶Cu@Fe3O4@MOF-199双模式传感平台：基于底物催化促进-抑制双效应驱动的Cr(VI)高灵敏检测新机制

本文创新性地构建了基于嗜温性产气荚膜梭菌Argonaute（CpAgo）核酸内切酶与表面增强拉曼散射（SERS）的免扩增多重核酸检测平台。通过CpAgo/gDNA介导的两轮连续切割实现特异性识别，结合聚苯乙烯（PS）纳米颗粒可控释放信号分子策略，在37℃常温条件下即可实现0.497 ng/μL检测限的多靶标同步检测，为复杂基质中核酸筛查提供了新型工具箱。

　　

Highlight

本研究亮点在于首次将嗜温性CpAgo的逐步切割特性与SERS的超灵敏检测能力相结合，开发出具有"信号级联放大-多重解码"双优势的一管式检测系统。通过PS纳米颗粒的"水缩-溶胀"智能控释特性，实现了拉曼报告分子"高负载-低背景"的协同增效。

Working principle

如方案1所示，该检测平台工作原理分为三步：1）表面修饰-COOH的PS纳米颗粒通过水相收缩封装拉曼报告分子；2）5'-生物素/3'-NH₂修饰的ssDNA连接链霉亲和素磁珠（MBs）与PS-SERS标签构建MB@PS信号输出平台；3）目标DNA存在时，三组gDNA引导CpAgo进行特异性切割，经四氢呋喃（THF）处理后释放大量拉曼分子，产生特征SERS信号。这种"切割激活-溶剂触发"的双重信号放大机制，使检测灵敏度较传统方法提升2个数量级。

Conclusion

本研究成功开发了基于CpAgo-SERS的免扩增多重核酸检测新方法。其创新性体现在：1）利用嗜温性CpAgo实现常温精准识别；2）PS纳米载体实现信号分子"封装-释放"智能调控；3）SERS指纹图谱解决多重检测串扰难题。在动物源性食品真伪鉴别应用中，该方法展现出优异的抗基质干扰能力，为现场快速检测提供了全新解决方案。