羟氯喹通过调控NLRP3/IL-17A和TLR4/NF-κB通路逆转AML化疗后重症感染免疫失衡的机制研究

本研究针对急性髓系白血病(AML)患者化疗后重症感染导致的免疫失衡难题，由赣南医学院第一附属医院团队通过临床样本分析结合THP-1细胞模型，首次揭示羟氯喹(HCQ)通过抑制CXCL12-CXCR4/7轴、调控Bcl-2/Bax-Caspase-3凋亡通路及NLRP3/IL-17A-TLR4/NF-κB信号网络，有效逆转细胞因子风暴并抑制白血病恶性生物学特征，为AML合并感染的治疗提供新策略。论文发表于《Clinical and Experimental Medicine》。

　　

急性髓系白血病(AML)作为成人最常见的血液系统恶性肿瘤，5年生存率仅约25%，化疗后重症感染导致的免疫失衡是主要死因之一。当感染引发"细胞因子风暴"时，IL-6、TNF-α等炎症因子失控释放，造成多器官衰竭。尽管现代医学已有多种治疗手段，但其疗效和安全性仍存争议。赣南医学院第一附属医院血液科团队发现，经典抗疟药羟氯喹(HCQ)具有独特的免疫调节潜力，但其在AML感染并发症中的作用机制尚属空白。

研究人员通过36例AML合并重症感染(AML-SI)患者与29例无感染AML患者(AML-NI)的对比分析，发现AML-SI组CXCL12、CXCR4/7及IL-6、IL-8、TNF-α水平显著升高。为阐明机制，团队建立THP-1单核细胞与AML患者骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)共培养模型，采用RNA-seq、流式细胞术等技术，系统评估HCQ对细胞凋亡、炎症通路的影响。关键技术包括：1)从AML患者骨髓标本分离原代BM-MSCs；2)建立PMA-LPS诱导的巨噬细胞活化模型；3)通过CCK-8和Hoechst 33258染色检测细胞活力与凋亡；4)ELISA检测炎症因子水平；5)Western blot分析凋亡及信号通路蛋白表达。

临床特征与细胞因子谱分析

比较三组受试者显示，AML-SI患者发热比例(94.44% vs 27.59%)、骨髓原始细胞比例(62.20% vs 57.15%)显著高于AML-NI组，且IL-6水平达健康对照组的15倍(276.53 vs 17.89 ng/mL)，证实炎症因子失衡与疾病严重程度相关。

HCQ对白血病细胞的调控作用

CCK-8实验显示HCQ以浓度依赖性方式抑制THP-1增殖(r=-0.593)，共培养组中20μmol/L HCQ使IL-6水平从85.37降至19.48 ng/mL。Western blot揭示HCQ上调Bax/Bcl-2比值并激活Caspase-3，诱导细胞凋亡，但对CXCL12-CXCR4/7轴的抑制作用较弱。

巨噬细胞活化模型的建立

通过PMA诱导THP-1分化为CD11b⁺ M0巨噬细胞，LPS刺激后转化为CD86⁺ M1型，伴随IL-6分泌量增加8倍。Wright-Giemsa染色显示活化细胞出现伪足等形态学改变。

HCQ对抗炎症风暴的机制

RNA-seq分析发现HCQ干预组差异基因富集于NOD样受体信号通路(校正P=1.2×10^-5)和IL-17通路。实验证实10μmol/L HCQ使CXCL8 mRNA表达降低62%，同时抑制NLRP3和磷酸化NF-κB p65蛋白表达。

该研究创新性揭示HCQ通过三重机制改善AML感染并发症：1)直接诱导白血病细胞凋亡；2)抑制BM-MSCs分泌促炎因子；3)阻断NLRP3/IL-17A-TLR4/NF-κB信号轴。这不仅为理解免疫微环境调控提供新视角，更为临床转化开辟途径——老药新用的策略可快速应用于AML合并感染患者的救治，尤其对化疗后粒细胞缺乏期的重症感染防治具有重要价值。研究建立的巨噬细胞活化模型也为后续免疫调节药物筛选提供了标准化平台。