改良复温方案提升供卵周期临床结局:卵母细胞玻璃化冷冻技术的优化突破

【字体: 时间:2025年08月17日 来源:Journal of Ovarian Research 4.2

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  本研究针对卵母细胞玻璃化冷冻复温流程复杂、耗时长的临床痛点,由Lee Women's Hospital团队通过改良复温方案(MWP)简化操作步骤并维持37℃恒温环境。结果显示,MWP使玻璃化卵母细胞的囊胚形成率(77.3% vs 57.5%)和持续妊娠/活产率(66.7% vs 50.4%)显著优于传统方案(CWP),且与新鲜卵母细胞效果相当。该成果发表于《Journal of Ovarian Research》,为辅助生殖技术(ART)提供了更高效的标准化操作流程。

  

在辅助生殖技术领域,卵母细胞冷冻保存一直是保障生育力的重要手段。然而传统的玻璃化冷冻复温流程需要9分钟多步骤操作,不仅增加实验室工作负荷,温度波动还可能影响卵母细胞纺锤体稳定性。更棘手的是,现有简化方案多针对胚胎设计,而体积更大、对渗透压更敏感的卵母细胞始终缺乏优化方案。这一瓶颈制约着卵子库的运营效率和临床结局。

台湾省台中市李妇女医院(Lee Women's Hospital)的Chun-I Lee团队在《Journal of Ovarian Research》发表的研究给出了创新解决方案。研究人员设计了两阶段改良复温方案(MWP):取消传统方案(CWP)中的洗涤步骤(WS),将复温时间从9分钟缩短至4分钟,并全程保持37℃恒温环境。这种设计既避免了快速复温导致的细胞膜过度膨胀(图1),又通过恒温条件维持了减数分裂纺锤体稳定性。

关键技术包括:1) 对9486枚玻璃化卵母细胞进行回顾性队列研究;2) 采用Cryotec玻璃化/复温系统;3) 通过时间 lapse培养系统(EmbryoScope+)动态监测胚胎发育;4) 根据Gardner标准评估囊胚质量;5) 采用人工周期或改良自然周期进行子宫内膜准备。

主要发现

  1. 1.

    卵母细胞存活与受精

    MWP与CWP组的存活率无差异(93.9% vs 93.7%),但玻璃化卵母细胞的异常受精率显著高于新鲜卵母细胞(9.1-10.1% vs 3.3%),可能与冷冻损伤影响精子染色质重塑有关。

  2. 2.

    胚胎发育潜力

    MWP组的囊胚形成率(77.3%)和可用囊胚率(51.4%)显著高于CWP组(57.5%,35.4%),且与新鲜卵母细胞(69.2%,48.5%)无统计学差异。多变量Poisson回归显示MWP使可用囊胚形成率提升42.3%(IRR=1.423)。

  3. 3.

    妊娠结局

    MWP组的持续妊娠/活产率(66.7%)显著优于CWP组(50.4%),调整混杂因素后的OR值达1.899。37℃恒温环境可能通过稳定减数分裂纺锤体(metaphase II plate)和加速冷冻保护剂(CPA)扩散来改善结局。

这项研究首次证实简化复温步骤结合恒温策略能显著提升玻璃化卵母细胞的发育潜能。MWP不仅将操作时间缩短56%,其临床效果更达到与新鲜卵母细胞相当的水平,为卵子库标准化操作提供了高级别证据。未来研究可进一步探索该方案在癌症患者生育力保存等特殊场景中的应用价值。

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