人参活性成分通过分子对接与超滤技术靶向激活CYP19A1酶治疗绝经后骨质疏松的研究

【编辑推荐】本研究创新性结合分子对接与亲和超滤技术，从人参中筛选出ginsenoside Re/Rf等能高效激活雌激素合成关键酶CYP19A1的活性成分，通过调控ALP/OPG通路抑制骨吸收，为天然药物治疗绝经后骨质疏松（PMOP）提供新靶点和新策略。

　　

Highlight

绝经后骨质疏松（PMOP）的核心病因是雌激素缺乏。芳香化酶（CYP19A1）作为雄激素转化为雌激素的关键限速酶，成为本研究的重要靶点。

Materials and reagents

人参（批号TF 0321）购自长春宏健药房，经长春中医药大学孙嘉明教授鉴定符合《中国药典》（2020版）标准。实验使用CYP19A1酶（长春白金生物公司）及ginsenoside Re（CAS:52286-59-6）、ginsenoside Rf（CAS:52286-58-5）等标准品（HPLC≥98%）。

qPCR分析

通过qRT-PCR检测MC细胞中CYP19A1 mRNA表达，以GAPDH为内参，采用2^-ΔΔCt法分析数据。结果显示ginsenoside Re/Rf可显著上调CYP19A1转录水平（见图8A）。

CYP19A1酶活性测定

酶联免疫吸附实验（630 nm波长）证实50%乙醇提取物具有最强酶激活活性（图1A），其分泌的雌二醇含量最高。

UHPLC-QE Orbitrap-MS与分子网络分析

采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术结合分子网络分析，锁定ginsenoside Re/Rf具有最高结合能和亲和率值。

Discussion

随着老龄化加剧，PMOP防治成为重大公共卫生问题。本研究突破性地将传统中药与现代筛选技术结合，证实ginsenoside Re/Rf通过激活CYP19A1促进雌激素合成，同时调控ALP/OPG平衡抑制osteoclast活性，为开发无副作用植物雌激素疗法奠定基础。

Conclusions

成功建立以CYP19A1为靶点的快速筛选体系，明确ginsenoside Re/Rf等4种成分通过激活该酶发挥抗PMOP作用，为中药现代化研究提供范式。