新型选择性培养基SB-10（蔗糖-杆菌肽琼脂）精准分离鉴定龋病关键病原体变异链球菌的研究

为解决传统MSB-20培养基对变异链球菌（S. mutans）分离特异性不足的问题，四川大学华西口腔医院团队开发了含10%蔗糖的SB-10新型选择性培养基。研究证实SB-10通过促进糖颗粒沉积（GtfB/C依赖）和典型菌落形态，显著提升S. mutans的分离准确率（临床样本验证达100%），为龋病风险评估和致病机制研究提供了优化工具。

　　

龋病作为全球高发的慢性感染性疾病，其发生发展与变异链球菌（Streptococcus mutans）的致龋特性密切相关。这种病原体通过产酸、耐酸、合成胞外多糖（EPS）和形成生物膜等机制破坏牙体硬组织。尽管现有龋病风险评估系统（如CAMBRA和Cariogram）将S. mutans作为关键生物标志物，但传统分离培养基MSB-20存在两大缺陷：20%蔗糖（MSB-20）的高渗透压抑制菌落生长，且难以区分S. mutans与远缘链球菌（S. sobrinus）。

针对这一技术瓶颈，四川大学华西口腔医院的研究团队在《BMC Oral Health》发表了创新成果。他们开发的蔗糖-杆菌肽琼脂（SB-10）通过优化蔗糖浓度（10%）和简化配方（不含亚碲酸钾和合成染料），不仅显著提升分离效率，更创造出独特的鉴定标志——菌落周围糖颗粒沉积现象。这种肉眼可见的特征性结构，为临床快速识别S. mutans提供了直观依据。

研究采用多维度技术路线：通过野生型UA159与△gtfB/C突变株对比，结合高效液相色谱（HPLC）分析糖颗粒成分；以MSB-20为对照，评估12种口腔常见菌（包括革兰阳性的S. gordonii和革兰阴性的P. gingivalis）的生长抑制效果；最后通过5例临床唾液样本（经伦理审批）的16S rRNA测序验证准确性。

关键研究发现

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   培养基性能比较

   SB-10培养的S. mutans菌落直径（1.58±0.21 mm）显著大于MSB-20（0.92±0.15 mm，P<0.0001），且CFU计数无差异，证明其兼顾生长促进与选择性。

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   糖颗粒形成机制

   野生型菌落周围可见大量糖颗粒（HPLC证实为葡聚糖），而△gtfB/C突变株完全缺失该特征，揭示葡糖基转移酶B/C（GtfB/C）是EPS合成的关键酶。

2. 2.

   特异性验证

   SB-10对S. oralis等8种非目标菌的抑制率达100%（10^-8稀释度未检出），且临床分离的60个典型菌落经测序全部确认为S. mutans，准确率显著高于MSB-20（80%）。

研究启示

这项研究突破了传统培养基的技术局限：① 降低蔗糖浓度减轻渗透压损伤，使菌落形态更典型；② 糖颗粒沉积现象成为直观鉴定标志，降低操作门槛；③ 简化配方（去除亚碲酸钾）提升生物安全性。作为龋病微生物研究的革新工具，SB-10为精准化风险评估和靶向防治策略制定提供了关键技术支撑。未来可进一步探索该培养基在复杂生物膜体系和流行病学调查中的应用价值。