基于实时重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的食品中副溶血性弧菌快速检测方法

本文开发了一种基于实时重组酶聚合酶扩增(real-time RPA)的副溶血性弧菌快速检测方法。该方法在39°C下20分钟内即可完成扩增，检测限(LOD5500)达114 CFU/mL，经GB 4789.45标准验证，其相对检测限(RLOD)较国标GB 4789.7低2.5倍，在鱼露、三文鱼等复杂食品基质中表现优异，为食品安全监测提供了高效可靠的分子检测新方案。

　　

亮点

• 首创针对食品基质的实时RPA快速检测体系

• 检测灵敏度突破114 CFU/mL阈值

• 在6小时富集后实现复杂样本的精准检出

• 与国标GB 4789.7检测结果100%吻合

讨论

随着全球海鲜消费量激增，传统培养法（耗时长达1周）已难以满足副溶血性弧菌的监测需求。本研究开发的实时RPA技术犹如"分子雷达"，通过toxS基因靶向捕获，在39°C温和条件下20分钟即可完成病原体扫描。特别设计的探针系统能有效规避近缘种（如溶藻弧菌、哈维氏弧菌等）的交叉反应，其114 CFU/mL的检测灵敏度堪比"微生物显微镜"。

结论

该研究构建的实时RPA检测平台，如同给食品安全监管装上了"高速引擎"：6小时富集结合20分钟扩增的工作流程，较传统方法提速50倍；2.5倍的灵敏度优势使其能捕捉到更微量的病原体信号。在鱼露、海鲜饭团等"高难度"样本中的稳定表现，预示着该技术在口岸检疫和餐饮监管领域的广阔应用前景。

作者贡献声明

宋丽平：研究设计与论文修订；耿建强：经费支持；索艺平：实验执行与初稿撰写；王丹等：数据采集与分析；李青尧等：方法学验证

利益冲突

全体作者声明不存在经济利益冲突

致谢与资助

本研究获国家重点研发计划(2022YFF1100902)和国家市场监督管理总局食品安全重点实验室资助