天麻素通过Alkbh5核定位及Gclm m6A去甲基化缓解缺血性脑卒中铁死亡的机制研究

本研究揭示了中药注射剂关西宁（GXNI）通过调控TLR4/NF-κB/MMP9神经炎症轴保护血脑屏障（BBB）的创新机制。采用3D-BBB类器官模型结合MCAO小鼠实验，首次证实丹参-川芎双药配伍中丹酚酸B（SAB）与洋川芎内酯I（SI）协同抑制MMP-9活性，显著改善缺血再灌注（I/R）损伤导致的紧密连接蛋白（ZO-1/claudin-5/occludin）降解及基底膜成分（laminin/collagen IV）流失，为卒中治疗提供新靶点。

　　

亮点

本研究首次揭示关西宁注射液（GXNI）通过双重调控TLR4/NF-κB信号传导和MMP-9酶活性，在三维血脑屏障模型和脑缺血再灌注小鼠中实现神经血管单元（NVU）保护作用。

方法

构建包含人脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞和周细胞的3D-BBB类器官，模拟氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）损伤。通过RNA测序和网络药理学锁定TLR4/NF-κB/MMP9关键通路，并采用表面等离子共振（SPR）验证丹酚酸B（SAB）与MMP-9的高亲和力结合。

结果

1. 1.

   类器官层面：GXNI剂量依赖性恢复跨内皮电阻（TEER），使紧密连接蛋白表达量提升2-3倍

2. 2.

   动物实验：治疗组梗死体积减少58.7%，Evans蓝渗出量降低62.3%

3. 3.

   分子机制：SAB-SI组合通过表观遗传调控TIMP-1启动子，抑制MMP-9的胶原降解活性

讨论

发现Wnt/β-catenin-MMP9轴在糖尿病合并卒中模型中的协同破坏作用，提出"神经炎症-基质重塑"恶性循环理论。天然化合物组合的协同指数（CI=0.82）显著优于单药治疗。

结论

GXNI通过多靶点调控神经血管单元稳态，其活性成分组合为开发卒中后BBB保护剂提供范式转换策略。