金雀异黄素通过抑制CB1受体过度激活调控cAMP-PKA信号通路改善胸主动脉夹层

本研究揭示了中药注射剂冠心宁（GXNI）通过靶向TLR4/NF-κB/MMP9神经炎症轴保护血脑屏障（BBB）完整性的新机制。采用3D-BBB类器官模型和大脑中动脉闭塞（MCAO）动物实验，证实GXNI能显著减轻氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）导致的紧密连接蛋白（ZO-1/claudin-5/occludin）破坏，降低P-糖蛋白（P-gp）表达，其活性成分丹酚酸B（SAB）与川芎嗪I（SI）协同抑制基质金属蛋白酶9（MMP9），为缺血性脑卒中治疗提供新策略。

Highlight

本研究首次在3D-BBB类器官和脑缺血再灌注（CIRI）小鼠模型中证实，冠心宁注射液（GXNI）通过调控TLR4/NF-κB/MMP9神经炎症轴保护血脑屏障完整性。其核心机制涉及：① 抑制氧化应激（ROS）并增强基底膜成分（层粘连蛋白/IV型胶原）；② 丹酚酸B（SAB）作为MMP9高亲和力结合剂，与川芎嗪I（SI）协同上调紧密连接蛋白表达；③ 在MCAO模型中减少26%梗死体积（p<0.01）。

Methods

采用人脑微血管内皮细胞-星形胶质细胞-周细胞构建3D-BBB类器官，建立OGD/R模型。通过RNA-seq和网络药理学筛选关键靶点，结合分子对接（AutoDock Vina）和表面等离子共振（SPR）验证活性成分-靶点相互作用。体内实验采用改良神经功能缺损评分（mNSS）评估CIRI小鼠神经功能。

Results

1. 1.

   GXNI使OGD/R模型跨内皮电阻（TEER）提升2.3倍，Evans Blue渗透率降低57%（p<0.001）

2. 2.

   免疫荧光显示SAB-SI组合使ZO-1表达量恢复至对照组82±5%，显著优于单药（p<0.05）

3. 3.

   分子动力学模拟揭示SAB通过氢键（ASP185）和π-π堆积（TYR248）稳定结合MMP9活性口袋

Conclusion

该研究不仅阐明神经炎症驱动缺血性BBB损伤的核心机制，更创新性地发现传统中药组分SAB-SI的协同作用：SAB直接抑制MMP9酶活，而SI通过NF-κB核转位阻断上游信号，二者形成"双靶点阻断"效应。这为开发脑卒中神经保护剂提供了新思路。