丹参川芎注射液及其活性成分组合通过TLR4/NF-κB/MMP9介导的神经炎症通路保护卒中诱导的血脑屏障损伤

本文揭示丹参川芎注射液（GXNI）通过调控TLR4/NF-κB/MMP9神经炎症轴，显著改善氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）和脑缺血再灌注损伤（CIRI）导致的血脑屏障（BBB）破坏。研究结合3D-BBB类器官模型和小鼠实验，证实其活性成分丹酚酸B（SAB）与川芎嗪I（SI）协同增强紧密连接蛋白表达，为缺血性卒中治疗提供新策略。

Highlight

GXNI改善BBB类器官细胞活力并减轻OGD/R损伤

研究发现，丹参川芎注射液（GXNI）以剂量依赖性方式提升氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）模型中的BBB类器官存活率（图1A、B），其效果优于阳性对照内皮分化抗原（EDA）。透射电镜显示GXNI能维持内皮细胞紧密连接结构，显著降低跨内皮电阻（TEER）和荧光素钠渗透率（P<0.01），证实其修复屏障功能。

分子机制：靶向TLR4/NF-κB/MMP9轴

RNA测序与网络药理学锁定TLR4/NF-κB/MMP9为关键通路。免疫荧光显示GXNI抑制NF-κB核转位，下调MMP9表达达47%（P<0.001），同时上调其抑制剂TIMP-1。分子对接证实丹酚酸B（SAB）与MMP9活性口袋结合能低至-9.8 kcal/mol，表面等离子共振（SPR）验证其结合常数K_D=2.3 μM。

活性成分协同效应

SAB-SI组合使紧密连接蛋白ZO-1和claudin-5表达提升2.1倍（vs 单药），并抑制P-糖蛋白（P-gp）外排功能（P<0.05）。小鼠模型中，该组合使梗死体积减少58%，Evans蓝渗出量降低62%，疗效超越单药组（P<0.01）。

Conclusion

本研究首次在3D-BBB模型中阐明GXNI通过多靶点调控神经炎症微环境保护屏障完整性，其"成分-靶点-通路"协同模式为中药复方研究提供范式。