FOLFOX-HAIC疗法通过促进三级淋巴结构形成重塑肝癌抗肿瘤微环境

本研究针对肝细胞癌(HCC)患者对FOLFOX-HAIC治疗响应差异的机制问题，揭示了HAIC疗法通过诱导TCM样CD4+T细胞、MMP2+成纤维细胞和FOLR2+CCL4+巨噬细胞通过LTβ-LTβR和CXCL12-CXCR4轴协同促进三级淋巴结构(TLS)形成，从而改善抗肿瘤免疫和患者预后的新机制，为优化HCC联合治疗策略提供了重要理论依据。

　　

肝细胞癌是全球第三大癌症相关死亡原因，晚期患者治疗选择有限且预后较差。虽然FOLFOX方案的肝动脉灌注化疗(HAIC)显示出一定疗效，但患者响应率差异显著，其背后的免疫调控机制尚不清楚。三级淋巴结构(TLS)作为肿瘤微环境中的免疫细胞聚集区，与多种癌症的预后改善相关，但在HCC中的形成机制和临床意义亟待阐明。

中山大学肿瘤防治中心的研究人员通过多组学分析发现，HAIC治疗可显著促进HCC肿瘤内TLS形成，且TLS阳性患者表现出更好的治疗响应和更长的无进展生存期。该研究揭示了TLS形成的新型细胞互作网络和分子机制，为HCC免疫治疗提供了新靶点，相关成果发表在《Cell Reports Medicine》上。

研究人员采用了临床样本队列分析(123例HAIC治疗患者)、单细胞RNA测序、多重免疫荧光染色、体外T细胞培养和小鼠肝癌模型等关键技术方法。通过比较HAIC治疗组与未治疗组的肿瘤组织，结合响应者与非响应者的多组学数据，系统解析了TLS形成的细胞和分子基础。

HAIC诱导的TLS形成与良好预后相关

研究发现HAIC治疗后63.7%的患者肿瘤内出现TLS，显著高于未治疗组(10%)。TLS阳性患者客观缓解率更高，无进展生存期显著延长，且这一相关性在HAIC联合免疫检查点抑制剂治疗组中也得到验证。TLS区域富含活化的CD8⁺T细胞和抗原呈递细胞，形成了促进抗肿瘤免疫的微环境。

T_CM样CD4⁺T细胞是潜在的LTi样细胞

单细胞测序显示中央记忆T细胞样(TC_M-like)CD4⁺T细胞高表达淋巴毒素β(LTβ)，具有干细胞样特性。体外实验证实HAIC处理的肿瘤间质液可诱导CD45RO⁺TCF1⁺CCR7⁺IL7R⁺CD4⁺T细胞产生，这些细胞在TLS中显著富集，可能是启动TLS形成的LTi样细胞。

MMP2⁺成纤维细胞和FOLR2⁺CCL4⁺巨噬细胞作为LTo样细胞

表达LTβR的MMP2⁺成纤维细胞和FOLR2⁺CCL4⁺巨噬细胞表现出典型的LTo细胞特征，包括高表达黏附分子、趋化因子和促血管生成因子。空间分析显示这些细胞与T_CM样CD4⁺T细胞在TLS内存在密切互作，共同构成TLS发育的支架结构。

CXCL12-CXCR4轴介导TLS相关细胞的招募

CXCR4在TLS形成相关细胞上广泛表达，而响应者肿瘤中CXCL12表达显著升高。动物实验证实CXCL12联合奥沙利铂可促进TLS样结构形成并抑制肿瘤生长，验证了该趋化因子轴在TLS组装中的关键作用。

这项研究首次系统阐明了HAIC治疗通过诱导TLS形成改善HCC患者预后的细胞和分子机制，揭示了T_CM样CD4⁺T细胞、MMP2⁺成纤维细胞和FOLR2⁺巨噬细胞通过LTβ-LTβR和CXCL12-CXCR4轴协同促进TLS发育的新型调控网络。这些发现不仅为HAIC治疗的疗效预测提供了TLS这一可靠生物标志物，也为开发靶向TLS的新型联合治疗策略奠定了理论基础，对改善HCC患者临床结局具有重要意义。