北爱尔兰老龄化纵向研究队列(NICOLA)中端粒长度的RT-PCR测定及其在衰老研究中的意义

研究人员针对衰老标志物检测需求，采用RT-PCR技术对北爱尔兰老龄化纵向研究队列(NICOLA)2,971名参与者进行端粒长度(TL)测定，建立首个该地区中老年人群端粒数据库。数据通过33批次实验验证，重复样本一致性良好(r>0.8)，为探究遗传(Genetic)、表观遗传(Epigenetic)因素与衰老关联提供关键分子指标，相关成果已通过Open Science Framework开放共享。

　　

随着全球老龄化进程加速，揭示衰老的生物学机制成为医学研究重点。端粒作为染色体末端的保护性结构，其长度(Telomere length, TL)随细胞分裂逐渐缩短，已被证实是评估细胞衰老的重要标志物。然而，不同人群的端粒长度基准数据仍存在空白，特别是缺乏基于大规模人群队列的系统性测量。北爱尔兰作为独特的人口遗传背景地区，其老龄化相关研究数据对理解健康衰老具有特殊价值。

英国女王大学贝尔法斯特分校(Queen's University Belfast)的研究团队利用北爱尔兰老龄化纵向研究队列(NICOLA)，开展了迄今该地区最大规模的端粒长度测定研究。这项发表在《BMC Research Notes》的工作，通过对2,971名50岁以上参与者血液样本进行绝对端粒长度定量分析，建立了首个覆盖北爱尔兰中老年人群的端粒基准数据库。

研究采用实时定量PCR(RT-PCR)技术，使用Absolute Human Telomere Length Quantification qPCR Assay试剂盒，在Roche LightCycler 480 II系统上完成检测。所有样本均设置三重复孔，并纳入32对盲法重复样本进行质控。研究特别关注了技术参数优化，设定Telomere Assay Threshold=0.8、SCR Assay Threshold=0.6，确保数据可靠性。队列特征显示参与者平均年龄64.07岁，男女比例47.7%:52.3%，覆盖从50岁至80岁以上各年龄段。

数据描述

研究人员成功获得2,971例有效数据，剔除1例异常样本后，平均端粒长度(ATL)呈非正态分布(p=1.55×10^-36)。重复样本分析显示高度一致性，证实测量方法的可靠性。值得注意的是，端粒长度与年龄呈负相关(r=-0.22)，且性别差异不显著(男性r=-0.22，女性r=-0.21)。

技术验证

通过32批次实验的系统性质控，包括非模板对照和水对照，证实实验体系稳定性。PCR效率中位数达到82.6%(端粒)和85.0%(单拷贝参照基因)，符合技术标准。批间变异分析显示数据质量可控，为后续研究奠定基础。

数据应用

该数据集作为NICOLA研究的组成部分，可与队列已有的大量表型数据(包括健康指标、疾病诊断、遗传变异和表观遗传时钟等)进行整合分析。研究者特别指出，这些数据已与美国健康与退休研究(HRS)和爱尔兰老龄化纵向研究(TILDA)等国际队列数据形成互补。

这项研究的重要价值在于建立了北爱尔兰地区首个中老年人群端粒长度参考数据库，为后续衰老机制研究提供关键分子指标。通过标准化RT-PCR检测流程获得的可靠数据，不仅可用于探究端粒长度与各种衰老相关疾病的关联，还能为表观遗传修饰、环境暴露等影响因素研究提供基线参照。

研究团队也坦诚指出技术局限性，包括仅采用RT-PCR单种方法检测，但引用既往研究数据证明该方法与Southern blot结果具有良好一致性(r>0.8)。随着NICOLA研究进入第三波次(2024年秋季启动)，这些基线数据将为追踪端粒动态变化提供重要对照。

该数据产品已通过Open Science Framework平台开放获取，包括原始数据文件和技术文档。这种开放科学实践有助于促进全球衰老研究的协作创新，特别是在比较不同人群衰老特征方面具有独特价值。未来研究可结合该队列持续收集的表型数据和分子指标，深入解析端粒长度在健康衰老中的调控机制。