混合膜包被仿生纳米颗粒通过抑制CXCL12/CXCR4通路增强三阴性乳腺癌免疫治疗响应

本研究针对三阴性乳腺癌(TNBC)免疫检查点抑制剂(ICI)响应率低的临床难题，开发了一种红细胞膜(RBCM)与肿瘤相关成纤维细胞膜(TAFsM)共包被的PLGA纳米颗粒(SAB-PLGA@RTM)，通过精准靶向TAFs抑制CXCL12分泌，阻断M2型巨噬细胞极化，重塑免疫抑制微环境。该研究为增强ICI疗效提供了新型递药策略，发表于《Journal of Nanobiotechnology》。

　　

在肿瘤治疗领域，三阴性乳腺癌(TNBC)因其缺乏雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER-2)表达，成为临床治疗的"硬骨头"。尽管免疫检查点抑制剂(ICI)为TNBC患者带来希望，但肿瘤微环境(TME)中大量存在的M2型肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)和肿瘤相关成纤维细胞(TAFs)构筑的免疫抑制屏障，使得多数患者对ICI治疗无响应。TAFs通过分泌CXCL12趋化因子，与巨噬细胞表面CXCR4受体结合，如同"催眠曲"般诱导巨噬细胞向促肿瘤的M2表型极化，形成保护肿瘤的"铜墙铁壁"。

安徽中医药大学的研究团队独辟蹊径，从传统中药丹参中提取活性成分丹酚酸B(Salvianolic acid B, SAB)，创新性地构建了红细胞膜(RBCM)与TAFs膜(TAFsM)杂化包被的仿生纳米颗粒(SAB-PLGA@RTM)。这种"特洛伊木马"式设计使纳米颗粒既具备RBCM的"隐身"功能以逃避免疫清除，又拥有TAFsM的同源靶向能力精准定位肿瘤。相关研究成果发表在《Journal of Nanobiotechnology》上。

研究团队采用超声融合法制备混合膜，通过F?rster共振能量转移(FRET)验证膜融合效率；利用双乳化法制备载药PLGA纳米核；通过Western blot检测特征蛋白CD47和FAP-α保留情况；建立4T1小鼠TNBC模型评估体内靶向性和治疗效果；采用流式细胞术分析免疫细胞浸润变化。

制备与表征

研究通过FRET和共定位实验证实RBCM与TAFsM成功融合，透射电镜显示SAB-PLGA@RTM具有典型核壳结构，粒径177.6±1.37 nm，zeta电位-27.8±0.67 mV。体外释放实验表明纳米粒具有缓释特性，10小时释药58.47%。蛋白分析显示纳米粒同时保留CD47(免疫逃避)和FAP-α(靶向)特征蛋白。

免疫逃逸与靶向验证

荧光显微镜和流式结果显示，SAB-PLGA@RTM被RAW264.7巨噬细胞的吞噬率较未包被组降低3倍(*p<0.001)，而对TAFs的摄取量比4T1肿瘤细胞高2.5倍，证实其双重功能。

M2极化抑制机制

Western blot显示SAB-PLGA@RTM使TAFs标志物α-SMA表达降低60%，ELISA检测CXCL12分泌量减少55%。当用TAFs条件培养基处理巨噬细胞时，SAB-PLGA@RTM组CD206(M2标记物)和CXCR4表达分别下降48%和52%，而AMD3100(CXCR4抑制剂)处理验证了该通路的关键作用。

体内抗肿瘤效果

在4T1移植瘤模型中，SAB-PLGA@RTM与PD-1抑制剂BMS-1联用使肿瘤体积缩小78%，生存期延长2.3倍。Masson染色显示胶原沉积减少65%，TUNEL显示肿瘤核心区凋亡细胞增加4倍。免疫荧光证实联合治疗组α-SMA和CD206表达最低。

免疫微环境重塑

流式分析显示联合治疗使肿瘤内CD8⁺T细胞浸润增加3.5倍，髓系来源抑制细胞(MDSC)减少70%。细胞因子检测显示IL-6、CCL2等免疫抑制因子显著下调，而IFN-γ水平提升2倍。

这项研究创新性地将中药活性成分与现代纳米技术结合，突破性解决了TAFs诱导的免疫抑制难题。SAB-PLGA@RTM通过"伪装-靶向-调控"三级级联策略，有效阻断了CXCL12/CXCR4这条肿瘤免疫逃逸的"秘密通道"，为增强ICI疗效提供了可转化方案。该成果不仅为TNBC治疗开辟了新途径，其仿生纳米设计思路更可拓展至其他实体瘤的联合免疫治疗领域。