靶向树突细胞的截短F蛋白微环DNA疫苗增强对VII型新城疫病毒的保护效力研究

本研究创新性构建了以减毒沙门氏菌为载体的微环DNA(mcDNA)疫苗，通过融合树突细胞靶向肽(DCpep)与截短型新城疫病毒(NDV)F蛋白(tF)，并协同表达鸡IL-18(ChIL-18)，显著提升黏膜sIgA和血清IgG水平。实验证实该疫苗能特异性激活树突细胞(CCL5/CCR7/CD83/CD86上调)，降低肺组织病毒载量，使雏鸡攻毒存活率达50%，为开发高效口服NDV疫苗奠定基础。

　　

Highlight

本研究采用延迟裂解型沙门氏菌χ11218作为疫苗载体，通过表达融合树突细胞靶向肽(DCpep)的截短新城疫病毒F蛋白(tF)，显著增强对新城疫(ND)的免疫应答。基于前期含全长F蛋白的pYL58质粒，成功构建重组质粒pYL220，其DCpep-tF融合蛋白去除了跨膜区(TM)和胞内域(CT)。

Section snippets

细菌、质粒、细胞与病毒

实验所用菌株与质粒见表1。大肠杆菌χ6212用于分子克隆，沙门氏菌χ11218用于免疫。pYL58质粒作为含全长F蛋白的对照载体。

DCpep-tF基因微环DNA质粒的设计与构建

通过引物tF-KpnI-F/tF-NotI-R从pYL173质粒扩增tF片段(1218bp)，与DCpep序列融合后插入pYL58骨架，最终获得可高效分泌表达的DCpep-tF融合蛋白载体。

Discussion

当前ND疫苗存在保护效力与持久性局限，靶向树突细胞(DCs)的策略成为研究热点。DCs作为连接先天与适应性免疫的关键细胞，其表面分子CCR7/CD83/CD86的上调表明本研究疫苗能有效激活抗原呈递通路。

Ethics statement

所有动物实验均通过吉林农业大学动物伦理委员会审批（批准号2025 03 10 001），符合实验动物护理与使用指南。

CRediT authorship contribution statement

作者贡献声明：巩晶烁负责数据整理；蒋彦龙负责论文构思与修订；杨天睿负责方法学建立；郭琦宇参与软件分析；王占楠等提供技术指导。

Declaration of Competing Interest

作者声明无利益冲突。

Acknowledgments

感谢吉林省教育厅自然科学基金(JJKH20240470KJ)、国家自然科学基金(32072897)等项目的资助。

Conflict of Interest

无利益冲突声明。