吡喹酮与奥芬达唑或芬苯达唑在鼠囊尾蚴病模型中的协同作用机制及治疗潜力

这篇研究通过体外和体内实验证实，吡喹酮(PZQ)与奥芬达唑(OXF)/芬苯达唑(FBZ)联用对Taenia crassiceps囊尾蚴具有显著协同杀灭作用。采用表面协同相互作用(SSI)分析发现，PZQ+OXF(1:5 nM比)的体外疗效较理论值提升11倍；体内实验显示PZQ+FBZ(1:4)和PZQ+OXF(1:1)分别使寄生虫负荷降低68.5%和49.5%。电镜观察证实联合用药可破坏微毛(MT)、肌肉纤维(MF)等超微结构，为神经囊尾蚴病(NCC)的临床治疗提供了新策略。

　　

ABSTRACT

当前神经囊尾蚴病(NCC)的药物治疗仅依赖吡喹酮(PZQ)和阿苯达唑(ABZ)，但受限于生物利用度低等问题。本研究创新性地评估了PZQ与奥芬达唑(OXF)的体外相互作用，以及PZQ与OXF/芬苯达唑(FBZ)的体内协同效应。通过表面协同相互作用(SSI)分析发现，16种组合中12种呈现协同效应，其中PZQ+OXF(1:5 nM比)的死亡率较理论值提升11倍。透射电镜显示联合用药可显著破坏寄生虫的皮层(TG)、生发层(GL)等结构。

INTRODUCTION

由猪带绦虫(Taenia solium)引起的NCC是中枢神经系统最致命的寄生虫病，在拉丁美洲、非洲和亚洲流行。现有治疗方案中，PZQ(50 mg/kg)与ABZ(15 mg/kg)联用虽能提升疗效，但仍有提升空间。OXF作为ABZ的结构类似物，在猪囊尾蚴病中展现65%的脑部杀虫率，其代谢产物FBZ同样具有抗蠕虫活性。本研究首次系统评估了这些药物组合的抗囊尾蚴潜力。

MATERIALS AND METHODS

采用Taenia crassiceps ORF株建立模型。体外实验通过SSI分析评估不同浓度组合，使用DMEM培养基培养11天，以台盼蓝染色判定死亡率。体内实验选用BALB/c小鼠，腹腔接种30个囊尾蚴后，连续20天口服给药。通过寄生虫干重计算杀虫率。超微结构分析采用透射电镜观察微毛(MT)、火焰细胞(FC)等变化。

RESULTS

In vitro cysticidal activity

PZQ的EC₅₀为118.5 nM，显著优于OXF的563.1 nM。最优组合PZQ(64 nM)+OXF(313.9 nM)实现73.3%死亡率，较理论值(6.7%)提升11倍。电镜显示联合组出现微毛脱落、肌纤维(MF)紊乱等特征性损伤，而单药组仅见局部结构破坏。

In vivo drug combinations

PZQ(200 mg/kg)单用杀虫率达73%，显著高于OXF/FBZ的39%和29%。但PZQ+FBZ(25+100 mg/kg)和PZQ+OXF(25+25 mg/kg)分别实现68.5%和49.5%协同杀虫率，较理论值提升1.8倍和1.6倍。所有组合均未观察到动物毒性反应。

DISCUSSION

研究首次揭示PZQ与苯并咪唑类药物的协同机制：PZQ通过电压门控钙通道引发虫体痉挛，而OXF/FBZ则破坏β-微管蛋白结构。这种多靶点作用解释了为何1:5 nM比的PZQ+OXF能达到192 nM PZQ单药的等效效果。值得注意的是，OXF在人体内已显示良好药代动力学特性，其半衰期长达22-34小时，为临床转化奠定基础。

Conclusions

该研究为NCC治疗提供了突破性方案：①低剂量PZQ+OXF/FBZ可减少用药量及副作用；②SSI模型为抗寄生虫药物组合筛选提供新方法；③电镜证据明确了超微结构损伤模式。后续需开展临床试验验证其对人源T. solium的有效性。