YY1诱导的长链非编码RNA HOXA11-AS通过表观修饰Nrf2通路激活氧化应激与炎症促进瘢痕疙瘩形成

这篇研究揭示了转录因子YY1通过激活长链非编码RNA HOXA11-AS的表达，进而招募EZH2/DNMT1复合物促进Nrf2启动子甲基化，最终导致氧化应激（ROS）加剧和炎症因子（TNF-α/IL-6/IL-1β）释放的分子机制。研究通过体外（HKF细胞模型）和体内（裸鼠移植瘤）实验证实，HOXA11-AS通过抑制Nrf2通路显著促进瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖、迁移和纤维化（COL1/α-SMA/Vimentin上调），为靶向YY1-HOXA11-AS-Nrf2轴治疗病理性瘢痕提供了新思路。

　　

背景

瘢痕疙瘩是皮肤创伤修复过程中出现的良性纤维增生性肿瘤，以细胞外基质（ECM）过度沉积和成纤维细胞异常增殖为特征。近年研究发现，长链非编码RNA（lncRNA）在瘢痕形成中起关键作用，其中HOXA11-AS的异常表达与胶原合成密切相关。氧化应激标志物（如ROS）在瘢痕疙瘩组织中显著升高，而抗氧化转录因子Nrf2的表达却受到抑制，但其调控机制尚未阐明。

方法

研究团队通过qRT-PCR和Western blot检测20例临床样本及培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞（HKF）中HOXA11-AS的表达水平。采用shRNA敲低和过表达质粒（OE-HOXA11-AS/OE-YY1）进行功能实验，通过CCK-8/EdU检测增殖、Transwell分析迁移侵袭、DCFH-DA/JC-1评估氧化应激和线粒体膜电位。表观调控机制通过RIP、ChIP、Co-IP和甲基化特异性PCR（MSP）验证，并建立裸鼠移植瘤模型进行体内验证。

结果

1. 1.

   HOXA11-AS在瘢痕疙瘩中的调控作用

   临床样本显示HOXA11-AS在瘢痕组织中表达较正常皮肤升高4.3倍（P<0.01），伴随纤维化标志物COL1/α-SMA上调2.1-3.5倍，而抗氧化蛋白NQO1/HO-1下降60%-70%。HKF细胞中敲低HOXA11-AS可使ROS水平降低42%，线粒体膜电位（ΔΨm）恢复至正常组的85%。

2. 2.

   表观遗传调控机制

   HOXA11-AS通过结合组蛋白甲基转移酶EZH2，招募DNA甲基转移酶DNMT1至Nrf2启动子区，导致其CpG岛甲基化水平增加3.8倍（MSP验证）。使用去甲基化剂5-Aza处理可逆转Nrf2表达抑制，证实甲基化依赖的转录沉默机制。

3. 3.

   YY1-HOXA11-AS-Nrf2轴

   生物信息学预测结合ChIP实验发现，转录因子YY1直接结合HOXA11-AS启动子的两个位点（site1:-1582~-1572bp；site2:-896~-886bp）。过表达YY1使HKF增殖速率提高2.4倍，该效应可被HOXA11-AS敲低完全阻断。

4. 4.

   体内实验验证

   裸鼠模型中，YY1过表达组移植瘤体积较对照组增大2.7倍（P<0.001），同时伴随Nrf2蛋白水平下降65%；而联合HOXA11-AS抑制后，瘤体缩小至对照组的80%，证实该通路的治疗靶向潜力。

讨论

该研究首次揭示YY1-HOXA11-AS-EZH2/DNMT1-Nrf2级联反应在瘢痕疙瘩中的核心作用。值得注意的是，HOXA11-AS通过双重定位（核/质）发挥作用：在胞核招募表观修饰复合物，在胞质可能作为miRNA海绵。与既往研究相比，创新性发现DNMT1（而非DNMT3a/3b）是介导Nrf2甲基化的主要效应分子。

结论

研究阐明了一条从转录因子到表观修饰的完整信号轴：YY1转录激活HOXA11-AS→EZH2介导DNMT1募集→Nrf2启动子高甲基化→抗氧化防御系统崩溃→氧化应激/炎症微环境形成→瘢痕增生。这为开发靶向DNA甲基化的小分子抑制剂或lncRNA拮抗剂提供了理论依据。