NINJ1寡聚化调控凋亡细胞来源的细胞外囊泡稳定性及内容物释放的机制研究

这篇研究揭示了NINJ1在凋亡细胞解体后期通过寡聚化调控凋亡小体（ApoBDs）膜破裂（PMR）的关键作用，阐明了其对损伤相关分子模式（DAMPs）和诺如病毒颗粒释放的调控机制，为炎症性疾病和病毒感染治疗提供了新靶点。

　　

NINJ1在凋亡小体稳定性调控中的关键作用

引言

细胞凋亡过程中产生的凋亡小体（ApoBDs）是直径1-5 μm的大型细胞外囊泡（EVs），通过膜起泡、突起和断裂三阶段形成。若未被吞噬细胞及时清除，凋亡细胞会进入次级坏死阶段，伴随质膜破裂（PMR）和炎症信号释放。NINJ1作为PMR的执行者，其寡聚化机制在凋亡进程中的时空调控尚不明确。

结果

研究发现，NINJ1在凋亡细胞解体完成后显著寡聚化，并通过蓝绿温和电泳（Blue Native-PAGE）和BS3交联实验证实其高阶寡聚体主要存在于ApoBDs上。CRISPR/Cas9敲除NINJ1的骨髓源性巨噬细胞（iBMDMs）显示，NINJ1缺失不影响caspase 3/7活性和凋亡小体形成，但显著抑制ApoBDs的PMR——乳酸脱氢酶（LDH）释放减少50%，FITC-葡聚糖内吞实验显示膜完整性提升2倍。

在功能层面，NINJ1调控ApoBDs释放高迁移率族蛋白B1（HMGB1）等DAMPs。诺如病毒（MNV）感染的iBMDMs中，NINJ1缺失使病毒颗粒释放减少2.5倍，提示其通过ApoBD裂解释放病原体的新机制。

讨论

该研究首次将NINJ1定义为细胞外囊泡稳定性的调控者。其作用时机具有生物学合理性：在凋亡细胞完成解体后启动PMR，既保障了efferocytosis的免疫耐受清除，又避免了过早裂解导致的炎症扩散。与gasdermin D被caspase 3剪切失活的机制类似，这种时序调控体现了细胞死亡程序的精密设计。

在疾病关联方面，NINJ1介导的ApoBD裂解释放自身抗原（如组蛋白）和病毒颗粒，可能推动自身免疫疾病和感染扩散。研究为开发NINJ1靶向疗法（如阻断抗体）提供了理论基础，同时为改善ApoBDs在疫苗开发等应用中的稳定性开辟了新路径。

材料与方法

实验采用BH3模拟物（ABT-737/S63845）诱导iBMDMs凋亡，通过差速离心分离ApoBDs。膜完整性通过LDH释放和FITC-葡聚糖排斥实验评估，HMGB1检测采用Lumit^?免疫分析法，病毒滴度通过噬斑实验测定。统计学分析采用双尾Student t检验。