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嗜热菌Geobacillus stearothermophilus GF16分泌组绿色合成银纳米颗粒的多功能特性研究:兼具抗氧化、抗菌和催化性能的稳定纳米材料
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月20日 来源:Microbial Cell Factories 4.9
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本研究通过优化嗜热菌Geobacillus stearothermophilus GF16分泌组合成银纳米颗粒(AgNPs)的条件,成功制备出具有优异热稳定性(120℃)和多功能特性的纳米材料。该AgNPs展现出79% DPPH和75% ABTS自由基清除活性,对金黄色葡萄球菌等病原体具有100μg/mL的完全抑制效果,并能在20分钟内催化降解刚果红。研究为绿色纳米材料在医疗和环境领域的应用提供了新策略。
在纳米技术飞速发展的今天,传统化学合成纳米材料的高能耗和毒性副产物问题日益凸显。银纳米颗粒(AgNPs)因其独特的物理化学性质,在医疗、催化和环境领域展现出巨大潜力,但如何实现绿色可持续生产仍是重大挑战。极端环境微生物因其特殊的代谢途径,成为解决这一问题的突破口。来自意大利火山热泉区的嗜热菌Geobacillus stearothermophilus GF16,这个耐重金属的"极端生存专家"引起了研究人员的注意。
研究人员采用紫外可见光谱(UV-Vis)、动态光散射(DLS)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和电子显微镜(SEM/TEM)等技术,系统优化了AgNPs的合成条件。以菌株分泌组为生物还原剂,通过调节AgNO3浓度(0.25-2.0 mM)、温度(25-80℃)、pH(5.0-12.0)和反应时间(24-48 h)等参数,获得了两种典型纳米颗粒AgNP0.5和AgNP2.0。采用热重分析(TGA)评估稳定性,并通过DPPH/ABTS抗氧化实验、溶血实验和时间杀灭试验等功能测试验证其生物活性。
AgNP形成的影响因素
通过颜色变化和UV-Vis光谱证实,60℃和pH 8.0是最佳合成条件,表面等离子体共振(SPR)峰位于410-470 nm。DLS显示颗粒水合直径52-128 nm,zeta电位-10.7至-24.4 mV,表明良好的胶体稳定性。FTIR分析揭示生物分子涂层中存在酰胺和芳香族化合物,且AgNP2.0显示出更强的表面相互作用。
形态学分析
电子显微镜显示AgNP0.5呈规则亚球形(17±5 nm),而AgNP2.0出现更多不规则聚集。这种形貌差异与FTIR揭示的表面化学特性高度一致,表明前驱体浓度直接影响纳米颗粒的自组装行为。
热稳定性分析
TGA证明两种AgNPs在120℃下仅失重<3%,远优于植物源和常温菌源纳米颗粒。这种卓越的热稳定性归因于嗜热菌分泌的耐热蛋白等生物分子涂层,为高温灭菌应用提供了可能。
抗氧化活性
AgNP2.0在100μg/mL浓度下表现出79%(DPPH)和75%(ABTS)的清除率,显著超过分泌组本身活性(18%)。这种"1+1>2"的协同效应提示生物分子涂层与银核共同参与了电子转移过程。
血液相容性
溶血实验显示,即使对脆性增加的β-地中海贫血红细胞,所有浓度AgNPs的溶血率均<1%,远低于临床安全阈值(2%)。这为静脉给药等医学应用扫清了重要障碍。
抗菌效能
时间杀灭实验证实,AgNP2.0在20小时内完全抑制金黄色葡萄球菌(100%)和铜绿假单胞菌(100%),对李斯特菌也有87%抑制率。最低抑菌浓度(MIC)测试显示,其对病原体的抑制效率是文献报道值的6倍以上,这种"超常发挥"可能与极端环境菌特有的抗菌机制有关。
催化性能
在NaBH4存在下,AgNPs能在20分钟和35分钟内分别完全降解刚果红(CR)和4-硝基酚(4-NP)。动力学分析符合伪零级模型,其催化效率媲美金纳米颗粒,但成本大幅降低。
这项研究首次全面表征了嗜热菌源AgNPs的多功能特性。Geobacillus stearothermophilus GF16作为"纳米工厂",仅需基础培养基即可高效产出性能优异的AgNPs,避免了传统方法的有毒试剂和高能耗问题。所得纳米材料集抗氧化、抗菌、催化三大功能于一身,且具有临床级血液相容性和罕见的热稳定性。该成果为开发可持续纳米技术提供了新思路:一方面,极端微生物资源库为纳米材料创新提供了"设计宝典";另一方面,这种"一菌多能"的合成策略,有望推动纳米医药、绿色催化和环境修复等领域的协同发展。未来研究可进一步探索分子机制,并拓展其在靶向治疗和工业催化中的应用场景。
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