艾灸通过调节辅助性关节炎大鼠膝关节滑膜组织中的VEGF/Rho家族蛋白来影响血管生成

《Journal of Acupuncture and Tuina Science》：Moxibustion affects angiogenesis by regulating VEGF/Rho family proteins in knee joint synovial tissue of rats with adjuvant arthritis

艾灸通过抑制VEGF表达及Rho家族蛋白激活减轻类风湿关节炎大鼠血管生成。方法：48只SD大鼠分为正常组、模型组、艾灸组及艾灸+VEGF激动组。模型组采用完全弗氏佐剂诱导类风湿关节炎，12天后艾灸组及联合组于双膝三阴交、关元及阿是穴悬灸20分钟/次，每日1次，共15次；联合组同时膝关节注射VEGF激动剂。结果：模型组CD31蛋白及VEGF mRNA/protein表达显著升高（P<0.01），艾灸组均显著降低（P<0.01），而艾灸+VEGF组与模型组无差异（P>0.05）。结论：艾灸抑制血管生成机制涉及VEGF调控及Rac1/Cdc42磷酸化抑制。

　　

摘要

目的

观察艾灸对辅助性关节炎模型大鼠膝关节滑膜组织中与血管生成相关指标的影响，探讨艾灸抑制滑膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）表达的机制，进而限制Rho家族蛋白Rac1和Cdc42的活化，从而在类风湿性关节炎（RA）治疗过程中抑制血管生成。

方法

根据随机原则，将48只雄性Sprague-Dawley大鼠平均分为正常组、模型组、艾灸组和艾灸+VEGF激动剂组。采用完全弗氏佐剂方法建立模型。建模后第12天，艾灸组和艾灸+VEGF激动剂组每天一次，在双侧足三里（ST36）、关元（CV4）和阿是穴进行悬灸治疗，每次20分钟，共15次。同时，艾灸+VEGF激动剂组在膝关节腔内注射VEGF激动剂（盐酸替罗非班）。使用苏木精-伊红染色法评估各组大鼠滑膜组织的病理变化。免疫组化法观察大鼠滑膜组织中的CD31表达水平。Western blotting法检测大鼠滑膜组织中VEGF、Rac1和Cdc42蛋白的水平，聚合酶链反应（PCR）法检测VEGF mRNA的表达。

结果

与正常组相比，模型组大鼠滑膜组织中CD31蛋白以及VEGF mRNA和蛋白的表达水平显著升高（P<0.01），磷酸化Rac1和磷酸化Cdc42蛋白的表达水平也显著升高（P<0.01）。艾灸干预后，艾灸组大鼠滑膜组织中CD31蛋白以及VEGF mRNA和蛋白的表达水平显著低于模型组（P<0.01），而艾灸+VEGF激动剂组与模型组在各指标上的差异无统计学意义（P<0.05）。与艾灸组相比，艾灸+VEGF激动剂组中CD31蛋白、VEGF mRNA和蛋白、磷酸化Cdc42及磷酸化Rac1的表达水平显著升高（P<0.01）。

结论

艾灸通过抑制血管生成改善了类风湿性关节炎（RA）患者的滑膜炎症。其机制可能是通过调节与血管生成相关的VEGF，限制Rac1和Cdc42的活化，并抑制血管内皮细胞的伪足形成，从而减少血管生成。