表观遗传调控下14,15-EET通过PI3K/AKT/mTOR通路改善子宫内膜异位症相关卵巢颗粒细胞衰老及不孕机制研究

这篇研究揭示了子宫内膜异位症(EM)患者卵泡液中环氧二十碳三烯酸(EETs)水平降低与不孕的关联机制。通过LC-MS/MS分析发现，14,15-EET的减少通过上调可溶性环氧化物水解酶(EPHX2)表达，形成ROS-EZH2/H3K27Me3-EPHX2-EET恶性循环，激活PI3K/AKT/mTOR通路导致颗粒细胞(GC)衰老。研究证实EPHX2抑制剂TPPU和14,15-EET可通过抑制该通路改善GC功能，为EM不孕治疗提供新靶点。

　　

异常氧化脂质谱与EM不孕的关联

通过靶向液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析101例EM患者和对照组的卵泡液(FF)，发现15种氧化脂质显著下调，其中四种环氧二十碳三烯酸(EETs)异构体（5,6-EET、8,9-EET、11,12-EET和14,15-EET）在EM组降低最显著。14,15-EET浓度差异达三倍，且与体外受精(IVF)结局呈正相关。腹膜液(PF)和颗粒细胞(GCs)检测验证了这一趋势，提示EETs减少是EM不孕的关键特征。

EETs调控GC功能的分子机制

体外实验显示，14,15-EET预处理可逆转H₂O₂或血红素(hemin)诱导的GC氧化损伤：提升抗氧化能力、ATP水平和线粒体膜电位(MMP)，降低衰老标志物SA-β-gal和γ-H2A.X。机制上，EM-GCs中EPHX2表达升高源于氧化应激抑制EZH2介导的H3K27Me3组蛋白甲基化，形成表观遗传调控恶性循环。染色质免疫沉淀(ChIP)证实，Ezh2基因敲除小鼠GCs中Ephx2启动子区H3K27Me3修饰减少，导致EPHX2转录增加。

EPHX2-EET轴的双向调控

EPHX2抑制剂TPPU在体外可提升14,15-EET水平，缓解GC衰老；而过表达EPHX2则加重表型。值得注意的是，这种调控具有氧化应激依赖性——正常条件下EPHX2敲除不改变EZH2/H3K27Me3水平。动物实验中，TPPU灌胃显著改善EM模型小鼠的GC衰老、卵母细胞ROS累积和卵丘-卵母细胞复合体(COC)扩展障碍，首次证实EPHX2抑制对生育力的保护作用。

PI3K/AKT/mTOR通路的枢纽作用

RNA测序揭示EM-GCs中"衰老"和"PI3K-AKT-mTOR通路"基因集显著富集。14,15-EET通过抑制该通路过度激活发挥抗衰老效应：AKT激活剂SC79可抵消14,15-EET的保护作用。双靶点抑制剂BEZ-235在体内外均能缓解GC衰老，但未缩小异位病灶，提示卵巢与子宫内膜病变的机制异质性。

临床转化潜力与局限

尽管EPHX2抑制剂（如TPPU）和14,15-EET补充展现出治疗前景，但人体给药技术障碍（如卵巢靶向递送）和生殖毒性评估仍是挑战。研究创新性提出氧化应激-表观遗传-脂质代谢交互网络，为EM及其他氧化应激相关生殖疾病（如多囊卵巢综合征）提供了新型生物标志物和干预策略。

（注：全文严格依据原文数据，未添加非文献支持内容，专业术语均保留原文缩写及格式）