靶向PP2A依赖与非依赖机制：佛司可林治疗KMT2A重排急性白血病的新策略

这篇研究揭示了佛司可林（forskolin）通过激活蛋白磷酸酶2A（PP2A）和抑制多药耐药蛋白（P-gp）的双重机制，在KMT2A重排急性髓系白血病（KMT2A-r AML）中展现出显著的治疗潜力。研究证实佛司可林能抑制c-MYC、HOXA9/10表达，增强柔红霉素（daunorubicin）敏感性，为临床联合用药提供了新思路。

　　

【背景与目的】

急性髓系白血病（AML）作为高度异质性疾病，其KMT2A（原MLL）基因重排亚型预后极差。蛋白磷酸酶2A（PP2A）作为关键抑癌因子，在70%AML病例中功能失活。本研究聚焦天然二萜化合物佛司可林（forskolin），系统探究其通过PP2A依赖与非依赖途径治疗KMT2A-r AML的分子机制。

【实验方法】

研究采用多组学技术：通过RNA-seq分析384例AML患者PP2A亚基表达谱；建立eGFP标记的KMT2A-r细胞系（THP1、MV411）和患者来源异种移植（PDX）模型；结合免疫印迹、PP2A活性检测和LC-MS药物蓄积分析；运用冷冻电镜（Cryo-EM）结构指导的分子对接模拟佛司可林与P-糖蛋白（P-gp）相互作用。

【关键发现】

1. 1.

   表达特征：PP2A催化亚基α（PPP2CA）在KMT2A-r AML中高表达，且与复杂核型AML存在显著差异（log2FC=0.42，padj=0.002）。

2. 2.

   细胞效应：

   • •

     佛司可林（40μM）显著抑制KMT2A-r细胞增殖（P<0.0001），诱导凋亡率提升2.5倍

   • •

     使柔红霉素（10nM）的细胞毒性增强3倍，PDX模型集落形成减少60%

   • •

     骨髓基质细胞（HS5）可部分削弱该协同效应

3. 3.

   分子机制：

   • •

     PP2A依赖途径：激活PP2A使ERK1/2磷酸化（Thr202/Tyr204）降低50%，下调c-MYC和HOXA9/10表达

   • •

     基因沉默实验证实：敲低PPP2CA可逆转佛司可林对c-MYC的抑制作用（P<0.01）

   • •

     非依赖途径：1,9-双脱氧佛司可林（无腺苷酸环化酶活性）仍保留60%协同效应

4. 4.

   创新机制：

   • •

     LC-MS显示佛司可林使细胞内柔红霉素蓄积量增加2.3倍

   • •

     分子对接揭示佛司可林与P-gp结合能达-9.8kcal/mol，竞争性抑制药物外排

   • •

     MD模拟证实其与柔红霉素可共定位于P-gp结合口袋（RMSD<1.5?）

【临床意义】

研究首次阐明：

1. 1.

   佛司可林通过"双通路"发挥作用：PP2A介导的信号抑制（ERK/c-MYC轴）联合P-gp抑制的化疗增敏

2. 2.

   1,9-双脱氧衍生物可避免cAMP相关副作用，提升治疗窗口

3. 3.

   为克服骨髓微环境耐药提供新策略

【展望】

该研究为KMT2A-r AML的精准治疗开辟了新途径，后续需开展：

• •

  佛司可林结构优化以提高靶向性

• •

  PP2A调控HOXA基因的具体机制解析

• •

  临床前动物模型的药效学验证

（注：全文数据均源自原文Figure1-9及附表，分子对接参数详见Methods 2.11-2.13章节，统计学处理符合Curtis等2025年BJPP指南要求）